T25m2 小鼠脉络膜血管细胞说明

注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

小鼠脉络膜血管细胞【Mouse Choroid: Normal Choroidal Vascular Cells】产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
收到冻存细胞的处理方法：
1.37°C水浴预热培养基；
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续暖细胞）；
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；
4.弃上清，加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中，轻轻晃匀；
5.置于37°C，5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话，瓶盖不要拧太紧)；
6.第二天，用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒 ，英文名： STK ELISA Kit 5-羟色胺盐酸盐（标准品）  Serotonin    质量规格：含量测定

小鼠丝酸/苏酸蛋酸酶(STK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 月见草油（标准品）  Evening primrose oil  质量规格：鉴别

小鼠丝酸转肽酶抑制剂Kazal type 3(SPINK3)ELISA试剂盒 ，英文名： SPINK3 ELISA Kit 龙血素A（标准品）  Loureirin A   质量规格：含量测定

小鼠斯钙素1(STC1)ELISA试剂盒 ，英文名： STC1 ELISA Kit 木栓酮（标准品）  FRIEDELIN  质量规格：鉴别

小鼠死亡关联蛋白激酶1(DAPK1)ELISA试剂盒 ，英文名： DAPK1 ELISA Kit 表木栓醇（标准品）  FRIEDELAN-3BETA-OL  质量规格：鉴别

小鼠死亡关联蛋白激酶3(DAPK3)ELISA试剂盒 ，英文名： DAPK3 ELISA Kit 老龙皮酸；网脊衣酸 A（标准品）  (4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid  质量规格：鉴别用

小鼠四旋蛋白30(TSPAN30)ELISA试剂盒 ，英文名： TSPAN30 ELISA Kit 焦性没食子酸（标准品）  Pyrogallol  质量规格：含量测定

小鼠松弛肽(RLN)ELISA试剂盒 ，英文名： RLN ELISA Kit 正十九烷（标准品）   N-NONADECANE   质量规格：内标

小鼠速激肽受体1(TACR1)ELISA试剂盒 ，英文名： TACR1 ELISA Kit 正十五烷（标准品）  N-PENTADECANE  质量规格：内标

小鼠速激肽受体2(TACR2)ELISA试剂盒 ，英文名： TACR2 ELISA Kit 咖啡酸乙酯（标准品）  ETHYL CAFFEATE  质量规格：含量测定
人肝脂酶(HL)试剂盒 Human hepatic lipase,HL ELISA Kit 甲地孕酮  Megestrol base  质量规格：>98.5%,BR

Rathepaticlipase,HLELISAKit大鼠肝脂酶(HL)ELISA试剂盒规格：96T/48T 甲地孕酮(标准品)  Megestrol base  质量规格：HPLC>98%,标准品

BJ5183细菌1毫升 3-缩酮  Estradiene dione-3-keta  质量规格：>99%,BR

Mouseierleukin10,IL-10ELISA试剂盒小鼠白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格：96T/48T 索拉非尼  Sorafenib base  质量规格：>95%,BR,可用于细胞培养

小鼠肾素(Renin)ELISA试剂盒 ，英文名： Renin ELISA Kit 二组胺；组胺  Histamine phosphate  质量规格：>98%,USP,BR

小鼠生长因子(GH)ELISA检测试剂盒Mousegrowthhormone,GHELISAKIT 96T/48T 氯喹,氯喹二盐  Chloroquine diphosphate  质量规格：>98%

人肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)试剂盒 Human L-FABP ELISA Kit (-)-莨菪碱,L-天仙子胺，L-天仙子碱  (-)-Hyoscyamine  质量规格：>99%

Rathepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit大鼠肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T (-)-莨菪碱,L-天仙子胺，澳洲毒茄碱(标准品)  (-)-Hyoscyamine  质量规格：HPLC>98%,标准品

BJ5183细菌1毫升 葡聚糖D70/右旋糖苷  Dextran D70  质量规格：Mw:63000~77000,USP32

MouseIerleukin11,IL-11ELISA试剂盒小鼠白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格：96T/48T 右旋糖苷/葡聚糖D40  Dextran D40  质量规格：Mw35 000 to 45 000
小鼠脉络膜血管细胞说明大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA检测试剂盒RatAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T 木犀草素（标准品）  Luteolin  质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠抗胰蛋白酶(AT)试剂盒 Rat Ai-ypsin,AT ELISA Kit 木犀草素 HPLC≥98% 20mg

大鼠抗增殖细胞核抗原(PCNA)抗体试剂盒 Rat proliferating cell nuclear aigen(PCNA)aibody ELISA kit 木犀草素  Luteolin  质量规格：HPLC≥97%,BR

大鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA检测试剂盒Ratproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 96T/48T 木犀草苷(标准品)  Cynaroside  质量规格：HPLC≥98%，标准品

大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA检测试剂盒Ratai-cenolandcenosomeaibody,ACAELISAKit 96T/48T 木犀草苷 HPLC≥98% 20mg

大鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)试剂盒 Rat ai-cenol and cenosome aibody,ACA ELISA Kit 木通苯乙醇苷B HPLC≥98% 20mg

大鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA检测试剂盒RatPerinuclearai-neuophilcytoplasmicaibody,pANCAELISAKit 96T/48T 木通苯乙醇苷B HPLC≥98% 10mg

大鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)试剂盒 Rat Perinuclear ai-neuophil cytoplasmic aibody,pANCA ELISA Kit 木糖基紫杉醇 HPLC≥98% 20mg

大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA检测试剂盒RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 96T/48T 木糖苷脱乙酰基紫杉醇 HPLC≥40% 20mg

大鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA检测试剂盒RatgranzymesA,Gzms-AELISAKit 96T/48T 木糖苷儿茶酚 HPLC≥98% 5mg