T25m2 大鼠心肌细胞说明

大鼠心肌细胞【Rat Cardiac: Normal Myocardial Cells】 产品描述：提供的原代细胞均来自新鲜组织，用于培养该细胞的组织采集是根据国际标准方案进行。细胞的培养采用公司PrimaCellTM原代细胞培养试剂盒来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在生物技术部标准的操作流程下，原代细胞可以保持分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右*培养基；2、说明书及注意事项；3、售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。

收到冻存细胞的处理方法：
1.37°C水浴预热培养基；
2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续暖细胞）；
3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞，1000rpm离心5min；
4.弃上清，加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中，轻轻晃匀；
5.置于37°C，5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话，瓶盖不要拧太紧)；
6.第二天，用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。

实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
实验报告：
一、分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISA试剂盒大鼠脱氢表雄同(DHEA)ELISA试剂盒规格：96T/48T 氯化天竺葵素,O双葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg

RatDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7大鼠脱氢表雄同S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒规格：96T/48T 氯化飞燕草素O桑布双糖苷 HPLC≥95% 20mg

RatDehydroepiandrosteroneS7,DHEA-S7ELISA试剂盒大鼠脱氢表雄同S7(DHEA-S7)ELISA试剂盒规格：96T/48T 槲皮素O葡萄糖酸苷 HPLC≥95% 20mg

RatDehydroepiandrosteronesulfate,DHEA-SELISA试剂盒大鼠脱氢表雄同酯(DHEA-S)ELISA试剂盒规格：96T/48T 氯化失车菊素O桑布双糖苷 HPLC≥95% 20mg

Ratdeoxypyridinoline,DPD大鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格：96T/48T 去氧鼠尾草酚 HPLC≥95% 20mg

Ratdeoxypyridinoline,DPDELISA试剂盒大鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA试剂盒规格：96T/48T 羟基柳杉酚 HPLC≥95% 20mg

RatDesmin,Des大鼠结蛋白(Des)ELISA试剂盒规格：96T/48T 亚丹参醌 HPLC≥95% 20mg

RatDesmin,DesELISA试剂盒大鼠结蛋白(Des)ELISA试剂盒规格：96T/48T 新隐丹参酮 HPLC≥95% 20mg

Ratdiamineoxidase,DAO大鼠氧化酶(DAO)ELISA试剂盒规格：96T/48T 柳杉酚； 脱氧代黄桧醇 HPLC≥95% 20mg

Ratdiamineoxidase,DAOELISA试剂盒大鼠氧化酶(DAO)ELISA试剂盒规格：96T/48T 罗汉果苷IIe HPLC≥95% 20mg
小鼠趋化因子(CC基序)配体2(MRC2)ELISA试剂盒 ，英文名： MRC2 ELISA Kit 头孢氨苄  Cephalexin  质量规格：>98%,BR,一水合物

小鼠脑素/脑尿肽(BNP)ELISA检测试剂盒Mousebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 96T/48T 头孢氨苄(标准品)  Cephalexin  质量规格：>98%,标准品

人钙蛋白酶2(M/II)大亚基(CAPN2)(CAPN2)试剂盒 Human CAPN2 ELISA kit 赤霉素GA3  Gibberellic acid(GA3 )  质量规格：>90%,BR

RatIerleukin17,IL-17ELISAKit大鼠白介素17(IL-17)ELISA试剂盒规格：96T/48T 氯霉素  Chloramphenicol  质量规格：>99%,BR

PASE-7蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25 氯霉素(标准品)  Chloramphenicol  质量规格：>99%,标准品

MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISA试剂盒小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T 氯霉素(植物细胞培养级)  Chloramphenicol  质量规格：>99%,用于植物细胞培养

小鼠趋化素(CHEM)ELISA试剂盒 ，英文名： CHEM ELISA Kit 阿魏酸钠   ferulic  质量规格：>99%

猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA检测试剂盒PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T 阿魏酸钠(标准品)   ferulic  质量规格：HPLC>99%(干品),标准品

大鼠坏死因子α(TNF-α)试剂盒 Rat Tumor necrosis factor α ,TNF-α ELISA kit 头孢妥仑匹酯  Cefditoren pivoxil  质量规格：>950μg/mg,BR

英文名称HumanAILR1(h)ELISAKIT人AILR1规格：96T/48T 头孢妥仑匹酯(标准品)  Cefditoren pivoxil  质量规格：效价测定
大鼠心肌细胞说明大鼠五聚素3(PTX3)试剂盒 Rat Penaxin 3,PTX3 ELISA Kit 氯化两面针碱 HPLC≥98% 20mg

大鼠戊糖素(Peosidine)ELISA检测试剂盒RatPeosidineELISAKit 96T/48T 氯化锂(分子生物学级)  Lithium chloride  质量规格：>98%

大鼠戊糖素(Peosidine)试剂盒 Rat advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit 氯化锦葵色素O葡萄糖苷 HPLC≥95% 20mg

大鼠硒蛋白P(SEPP1)试剂盒 Rat selenoprotein P, plasma, 1 (SEPP1)ELISA kit 氯化锦葵色素O半乳糖苷 HPLC≥95% 20mg

大鼠细胞凋亡调节因子BAX(BAX)试剂盒 Rat Apoptosis regulator BAX,BAX ELISA kit 氯化锦葵色素O阿拉伯糖苷 HPLC≥95% 20mg

大鼠细胞毒性T细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)试剂盒 Rat Cytotoxic T Lymphocyte Associated Aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit 氯化金  Gold (III) chloride tetrahydrate  质量规格：BC

大鼠细胞分裂周期基因(CDC)试剂盒 Rat cell division cycle gene,CDC ELISA Kit 氯化铬六水(>98%,BR)  Chromium(III) chloride, hexahydrate  质量规格：>98%,BR

大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)试剂盒 Rat iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit 氯化铬;三氯化铬  Chromium(III) chloride  质量规格：>98%

大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA检测试剂盒Ratiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1ELISAKit 96T/48T 氯化钙二水  Calcium chloride, dihydrate  质量规格：>99%,BR

大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2)试剂盒 Rat iercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit 氯化飞燕草素O芸香糖苷 HPLC≥95% 20mg
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。