细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)50T使用说明书实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)50T使用说明书注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
IGF1 Protein Human 重组人 IGF1 / IGF-I 蛋白
大鼠肾动脉平滑肌细胞*培养基 100mL
CD1B Others Human 人 CD1B / CD1A 人细胞裂解液 (阳性对照)
H9c2(2-1)大鼠心肌细胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S
视网膜神经节细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
H4-II-E-C3(大鼠肝癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠肾小管上皮细胞MREpiC
人胚胎,皮肤,肌肉;M-20
CNPY4 Others Human 人 CNPY4 人细胞裂解液 (阳性对照)
SD大鼠骨髓间质干细胞 SD rat bone marrow mesenchymal stem cells
HME4细胞,人黑色素瘤细胞 青春双歧杆菌 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0905
UACC-812(人导管瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
HuH-7(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤 EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928
HDAC8 Others Mouse 小鼠 HDAC8 / HDACL1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人真皮微血管内皮细胞cDNAHDMEC cDNA
KM小鼠未分化神经胶质瘤瘤株;B22
ZR-75-30细胞,癌细胞 人食管癌细胞,TE-11细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B6
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人神经调节蛋白4(NRG4)免疫试剂盒 Human neuregulin-4,NRG4 ELISA kit
MouseHighmobilitygroupproteinB1,HMGB-1ELISAKit小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Caspase-2-G(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
Humanmicroalbunminuria,MAU/ALBELISA试剂盒人尿微量白蛋白(ALB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanplaetmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human transforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanInterleukin10,IL-10ELISA试剂盒人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织抗坏血酸比色法定量检测试剂盒20次
Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰岛淀粉样多肽(IAPP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法)50T使用说明书大鼠Toll样受体4(TLR4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠TNF-B酶联免疫分析ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
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