细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法,2D电泳用)50T实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法,2D电泳用)50T实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法,2D电泳用)50T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)
大鼠肾小球内皮细胞*培养基 100mL
GP140 Others HIV 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 人细胞裂解液 (阳性对照)
PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]杂交瘤细胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 灭活血清
食管癌组织源性原代细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)/1ml
HAN(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺细胞培养基SCM
CL-0373KiMA(人胚肾上皮细胞系)5×106cells/瓶×2
CNKSR3 Others Human 人 MAGI1 / CNKSR3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人肝细胞总RNAHH tRNA
大耳山羊皮肤细胞;LDG-3 B淋巴细胞,WEHI 22.1细胞 M5076细胞,小鼠网织细胞肉瘤
人胚肺二倍体细胞;HEL-2
HA Others H11N2 甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照)
PDK1 Others Human 人 PDK-1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
人真皮微血管内皮细胞-HDMEC-a
狗肾细胞;Super Tube
CTLL-2细胞,T细胞 人胰腺癌细胞,JF-305细胞 CM-M016小鼠胰腺星状细胞*培养基100mL
大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人神经调节蛋白2(NRG2)免疫试剂盒 Human neuregulin-2,NRG2 ELISA kit
MouseHistamine,HISELISAKit小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
PASE-3蛋白表达西方杂交分析试剂盒5次
Humanmicrotubule-associatedprotein2,MAP-2ELISA试剂盒人微管相关蛋白2(MAP-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanplaet-associatedComplement3,PAC3ELISAKit人血小板相关补体3(PAC3)ELISA试剂盒规格:96T/48T
人抑制素A(INH-A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human transthyretin (TTR) ELISA Kit 人转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA试剂盒
HumanIntestinaltrefoilfactor,ITFELISAKit 人肠三叶因子(ITF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanInterleukin12,IL-12/P40ELISA试剂盒人白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织科萨基病毒A(CoxsackievirusA)定性检测试剂盒20次
HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)ELISA试剂盒规格:96T/48T
细菌蛋白快速提取试剂盒(离心柱法,2D电泳用)50T实验方法大鼠P53抗体(P53-ab)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠P53(P53)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠P21蛋白(P21)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
大鼠N-乙酰基-丝酰-天门冬酰-赖酰-脯酸(AcSDKP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装