TdT 加尾法 DNA 标记试剂盒5次说明书使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 *将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
TdT 加尾法 DNA 标记试剂盒5次说明书详细说明书:
TdT 加尾法 DNA 标记试剂盒5次说明书确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
TdT 加尾法 DNA 标记试剂盒5次说明书步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹。
大鼠胰淀素(Amylin)ELISA试剂盒 ,英文名: Amylin ELISA Kit
人抗sp100抗体(sp100)ELISA检测试剂盒Humananti-sp100-antibodyELISAKit 96T/48T
大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)免疫试剂盒 Rat beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA Kit
CLIAKitforT3三碘甲状腺原氨酸(T3)规格:48T/96T
人体SOCS-3基因甲基化检测试剂盒20次
ELISAKitABM-Ab人抗肺泡基底膜抗体规格:48T/96T
小鼠X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒 ,英文名: XRCC5 ELISA Kit
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA检测试剂盒HumanplaetmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T
大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)免疫试剂盒 Rat matrix metalloproteinase 7,MMP-7 ELISA kit
英文名称RatCCL26ELISAKit大鼠CCL26规格:96T/48T
口香糖*比色法定量检测试剂盒20次
ELISAKitSRF/IF人皮肤反应因子/炎性因子规格:48T/96T
小鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human neural cell adhesion molecule ligand 1 (NCAM-L1/CD171) ELISA Kit 人神经细胞粘附分子配体1(NCAM-L1/CD171)ELISA试剂盒
humanfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit 人促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanantimousantibody,HAMAELISA人抗鼠抗体(HAMA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物葡萄糖磷酸变位酶(phosphoglucomutase;PGM)电泳分析试剂盒5次
Humanurokinaseplasminogenactivator,uPAELISAKit人*型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Lyso-PAF C-16-d4 (1 mg) 1-O-hexadecyl-(7,7,8,8-d4)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4; Lyso-PAF C-16-d4
UNC3230 (25 mg) 5-[(cyclohexylcarbonyl)amino]-2-(pxenylamino)-4-thiazolecarboxamide
APC-标记链霉亲和素偶联物 1 mg/ml APC-streptavidin conjugate 1 mg/ml
CAY10679 (25 mg) 1,1’-(1,8-dioxo-1,8-octanediyl)bis[glycyl-glycine; N,N’-bis(glycyl-glycine)-hexane-1,6-Dicarboxyamide; CAY10679
Linoleic Acid (500 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid
2-Acetylnaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione; BBI608 Cancer Cell Stemness Inhibitor, BBI608
GLP-1 (7-36) amide (chicken, common turkey)His-Ala-Glu-Gly-Thr-Tyr-Thr-Ser-Asp-Ile-Thr-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Asn-Gly-Arg-NH2
WWamide-2Trp-Arg-Glu-Met-Ser-Val-Trp-NH2
[Leu144]-PLP (139-151), L144-PLP(139-151)His-Ser-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-His-Pro-Asp-Lys-Phe
Biotin-[Tyr0]-Orexin B, mouse, ratBiotin-Tyr-Arg-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Asn-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
Octreotide AcetateD-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-Ol(Disulfide bridge Cys2-Cys7)
TdT 加尾法 DNA 标记试剂盒5次说明书三正丙胺TripropylamineCP250mL
CA1351-2.5g低熔点琼脂糖39346-81-12.5g0
ER0602Pae I2500 units
Plasmid Midi Kit100T
INT500mg