填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次说明书使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 *将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用*抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次说明书详细说明书:
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次说明书确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次说明书步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹。
大鼠胰高血糖素(GC)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人新喋呤(NEOP)免疫试剂盒 Human neopterin,NEOP ELISA kit
胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)测试盒 紫外分光光度法 50管/48样
Ratmajorbasicprotein,MBPELISA试剂盒大鼠主要碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA试剂盒人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanleukoregulin,LRELISAKit人白细胞调节素(LR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)ELISA试剂盒 ,英文名: p-NF-κB ELISA Kit
人血小板活化因子(PAF)ELISA检测试剂盒Humanplaetactivatingfactor,PAFELISAKit 96T/48T
鲨鱼*(Cortisol)免疫试剂盒 Shark Cortisol ELISA Kit
CLIAKitforOVAsIgE(HumanovalbuminspecificIgE)ELISAKit人卵清蛋白特异性IgE规格:48T/96T
台桌清洁剂(饭桌、工作台、学生课桌椅等)500毫升/瓶
ELISAKitIL-1α人白介素1α规格:48T/96T
小鼠*A(CsA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat phosphorylated extracellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 大鼠磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒
humanprolactin,PRLELISAKit 人催乳素(PRL)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humananti-myelinantibodyIgA,AMAIgAELISA试剂盒人抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物醛同还原酶(aldo-ketoreductase)总活性比色法定量检测试剂盒20次
Humanuridinedipho-sphateglucuronosyltransferase2familypolypeptideB4,UGT2B4ELISAKit人二磷酸尿核苷葡糖醛酸基转移酶2家族肽B4(UGT2B4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1-Arachidonoyl Glycerol-d5 (1 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 1-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 1-AG-d5; 1-Arachidonoyl Glycerol-d5
S-(4-nitnobenzyl)-6-thioinosine (50 mg) NBMPR|NBTI|NSC 296962; S-4-nitnopxenylmetxyl-6-thioinosine
APC-iFluor 750-标记链霉亲和素偶联物 1 mg/ml APC-iFluor 750-streptavidin conjugate 1 mg/ml
N-acetyl-3,4-metxylenedioxymetxcathinone (50 mg) N-
Linoleic Acid (peroxide free) (500 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid (peroxide free)
1-N-[2-(1H-indol-3-yl)etxyl]-4-N-pyridin-4-ylbenzene-1,4-diamine; Serdemetan JNJ-26854165
GLP-2 (1-34) (human)His-Ala-Asp-Gly-Ser-Phe-Ser-Asp-Glu-Met-Asn-Thr-Ile-Leu-Asp-Asn-Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Asn-Trp-Leu-Ile-Gln-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Arg
Xenopsin (XP)Pyr-Gly-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu
[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (porcine)Tyr-Pro-Ser-Lys-Pro-Asp-Asn-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Pro-Ala-Glu-Asp-Leu-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
Biotin-Amyloid β-Protein (1-40)Biotin-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val
Orexin B, humanArg-Ser-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg-Leu-Leu-Gln-Ala-Ser-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
填入法 DNA 末端标记试剂盒 C5次说明书1,1,2-三录乙烷1,1,2-TrichloroethaneCP500mL
CA1311-5g3-安基-1,2,4-三唑(3-AT)61-82-55g0
ER0582?Nde I
PolyGel DNA Extraction Kit100T
Iodoacetic Acid, wo7ium Salt100g