产品名称:5-8F 人高转移鼻咽癌细胞系保存运输
英文名称:5-8Fhighly metastaticnasopharyngeal carcinoma cell line
规格:5×105cells/瓶
产品货号:FS-X0148
5-8F 人高转移鼻咽癌细胞系保存运输的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满*培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
收到后的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的*培养基。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的*培养基。
5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得。
5-8F 人高转移鼻咽癌细胞系保存运输培养操作流程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备F-12K培养基(F-12K,GIBCO,货号21127-022),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混 合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换 液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
3.轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
4.移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;
1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
非酶细胞裂解液 英文名称: NECDS 规格: 100 ml
细胞冻存液 英文名称: CFM 规格: 50 ml
无血清细胞冻存液 英文名称: SF-CFM 规格: 50 ml
台盼蓝 英文名称: TB 规格: 50 ml
磷酸盐缓冲注 英文名称: DPBS 规格: 500 ml
* 英文名称: HBSS 规格: 500 ml
多聚赖氨酸 1 mg/ml 英文名称: PLL 规格: 1 ml
多聚赖氨酸10 mg/ml 英文名称: PLL 规格: 1 ml
胎牛血清 英文名称: FBS 规格: 500 ml
*/*溶液 英文名称: P/S 规格: 5 ml
*/*溶液 英文名称: P/S 规格: 100 ml
抗真菌溶液 英文名称: AMS 规格: 50 ml
抗霉菌溶液 英文名称: ABAMS 规格: 50 ml
细胞培养超纯水 英文名称: CCGW 规格: 500 ml
肌细胞分离液 英文名称: MDS 规格: 100 ml
牛脑垂体提取物 英文名称: BPE 规格: 25 mg
牛脑垂体提取物 英文名称: BPE 规格: 100 mg
胰岛素铁硒传递蛋白 100x 英文名称: ITS 规格: 10 ml
左旋*溶液 200 mM 英文名称: L-Gue 规格: 100 ml
非必需氨基酸 100X 英文名称: NEAA 规格: 100 ml
纤维粘连蛋白-牛源 英文名称: BPF 规格: 1mg
I 型胶原细胞检测试剂盒 英文名称: Col 规格: 48 tests/48 well plate
纤维母细胞粘附检测试剂盒 英文名称: Fibro 规格: 48 tests/48 well plate
MTT细胞活力和增殖检测试剂盒 英文名称: MTT 规格: 1000 tests/96 well plate
WST-1细胞活力和增殖检测试剂盒 英文名称: WST 规格: 1000 tests/96 well plate
细胞衰老检测试剂盒 英文名称: CSA 规格: 50 tests/53 mm plate
5-8F 人高转移鼻咽癌细胞系保存运输β-半乳糖苷酶比色检测试剂盒 英文名称: GalC 规格: 50 tests/53 mm plate
LDH细胞毒性检测试剂盒 英文名称: LDH 规格: 500 tests/96 well plate
TUNEL色标法细胞凋亡检测试剂盒 英文名称: TUNEL 规格: 50 tests/96 well plate
一氧化氮色标法检测试剂盒 英文名称: NO 规格: 250 tests/96 well plate
硝基苯磷酸钠(pNPP)磷酸酶检测试剂盒 英文名称: pNPP 规格: 500 tests/96 well plate
孔雀绿磷酸盐检测试剂盒 英文名称: MGmP 规格: 2500 tests/96 well plate
比色法钙分析试剂盒 英文名称: CCA 规格: 250 tests/96 well plate
活/死细胞染色试剂盒 英文名称: CSK 规格: 1000 tests/96 well plate
比色法GAPDH分析试剂盒 英文名称: GAPDH 规格: 1000 tests/96 well plate