培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | BJ-X96459 |
商品介绍:
名称 LLC (LL/2; LLC1) (小鼠肺癌细胞) 别称LL/2 (LLc1); LL/2(LLc1); LL/2; LL2; LLC1; LLC; Lewis lung carcinoma line 1; Lewis lung carcinoma; Lewis-Lung; Lewis Lung 种属小鼠 年龄(性别)不详 组织来源肺 生长特性半贴半悬 细胞形态上皮细胞样 背景描述LLC细胞是小鼠Lewis肺癌细胞。 生物安全等级1 生长培养基DMEM+10% FBS+1% P/S 推荐传代比例1:2-1:4 推荐换液频率2~3次/周 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 致瘤性Yes, in C57BL mice. 抗原表达情况H-2b |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
大鼠 LGALS1 基因全长ORF克隆
大鼠 NPHS1 / Nephrin 基因全长ORF克隆
大鼠 PEAR1 基因全长ORF克隆
大鼠 PVRL1 基因全长ORF克隆
大鼠 NTRK2 基因全长ORF克隆
大鼠 HepaCAM2 基因全长ORF克隆
大鼠 ESAM 基因全长ORF克隆
大鼠 F11R 基因全长ORF克隆
大鼠 ICAM2 基因全长ORF克隆
大鼠 NINJ1 / Ninjurin1 基因全长ORF克隆
LLC (LL/2; LLC1) (小鼠肺癌细胞)10g 氯化铯 Cesium Chloride(CsCl) 室温干燥保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Prostate-specific antigen
20次 免疫蛋白清除剂 HYLB肉汤进口、国产HYLB Broth100克BR
250g 聚乙二醇 12000 PEG12000 室温保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-X-C chemokine receptor type 3
改良EC(mEC+n)肉汤 Modified EC Enrichment Broth 10ml*20支/包 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Phospholipase D3
10mL ONPG溶液,10mg/mL O-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside -20℃干燥避光保存 0.156-10 ng/mL 人Ⅲ型胶原C末端肽(CTXⅢ)ELISA试剂盒
100mL Kinase Stop Buffer,5X Kinase Stop Buffer,5X 常温保存
1mL SDS-PAGE上样液,5× SDS-PAGE Loading Buffer,5× -20℃保存亚利桑那菌琼脂(SA) 进口、国产Salmonella Arizona Agar用于亚利桑那沙门氏菌的选择性分离(SN标准)100
10次 克必隆eTS抑制性差减杂交PCR试剂盒 SSH-PCR Kit -20℃保存
1g 2,6- 二氯靛钠 2,6-Dichloroindophenol Sodium Salt Hydrate 室温干燥避光保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Diacylglycerol
2 ug pFastbac His HT A pFastbac His HT A 低温运输,-20℃保存
125mL NP40 Lysis Buffer,2X(NP40裂解液,2X) NP40 Lysis Buffer,2X 常温保存