培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | BJ-X96511 |
商品介绍:
名称 RBL-2H3 (大鼠嗜碱性细胞白血病细胞) 别称RBL2H3; RBL 2H3; RBL.2H3 种属大鼠 年龄(性别)不详 组织来源外周血;化学诱变嗜碱性细胞;白血病 生长特性贴壁细胞 细胞形态成纤维细胞样 背景描述RBL-2H3细胞是1978年国立牙科研究所的免疫学实验室从Wistar大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。RBL-2H3细胞具有高亲和力的IgE受体,通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。RBL-2H3细胞广泛地用于研究肥大细胞FcERI和分泌的生化途径。RBL-2H3细胞是研究FcERI结构的模型。它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面,包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G蛋白的作用。虽然几乎所有批号的FBS都支持细胞的生长,但在某些批号中FcERI集聚后脱粒化得更好。另一株大鼠嗜碱性细胞株(RBL)不会脱粒化。 生物安全等级1 生长培养基MEM+15%FBS+1% P/S 推荐传代比例1:3-1:4 推荐换液频率2~3次/周 倍增时间~50-60小时 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ 受体表达情况FcERI (Fc of IgE) 基因表达情况histamine |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
人 RELA / Transcription factor p65 / NFkB p65 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 Vitronectin 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 CYP2D6 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 CYP2D6 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 HIF1A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 无标签
人 HIF1A 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带FLAG标签
人 OLFM4 基因全长ORF克隆
RBL-2H3 (大鼠嗜碱性细胞白血病细胞)50T 猪内源性逆转录病毒PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Glypican-3
5g 3- 氨基 -9- 乙基咔唑 AEC (3-Amino-9-Ethylcarbazole) 常温保存 0.156-10 ng/mL 人 Sestrin 2蛋白(SESN2)ELISA试剂盒
125mL HEPES Lysis Buffer with NP-40,2X HEPES Lysis Buffer with NP-40,2X 常温保存
2 ug pSE934 pSE934 低温运输,-20℃保存Fraser 添加剂进口、国产Fraser Supplement添加到HB4193中,用于李氏菌的选择性增菌培养5ml*2支
培养基1(USP) 250g
5g B6 Vitamin B6 室温保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Synaptophysin
125mL Phosphate Buffered RIPA with Glycerol,2X Phosphate Buffered RIPA with Glycerol,2X 常温保存
5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine −20℃保存 0.078-5 EU/mL ELISA Kit for Human Calcitonin gene-related peptide 1
5 mg H-89 . 2HCL(PKA抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存 78-5000 pg/mL 人α-烯醇化(Alpha-enolase)ELISA试剂盒
1瓶 U-2 OS-Luc teT-on株 U-2 OS-Luc teT-on 低温运输和保存 0.625-40 ng/mL 人泛素蛋白连接E3成分N-识别蛋白4ELISA试剂盒
2 ug pET-33b(+) pET-33b(+) 低温运输,-20℃保存乳糖肉汤 进口、国产Lactose Broth用于食品中沙门氏菌检验前增菌250