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产品名称 | |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 |
货号 | BJ-X97268 |
商品属性:
名称 大鼠心肌细胞 2.组织来源:心脏组织 3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶 4.细胞简介: 大鼠心肌细胞分离自心脏组织;心脏是脊椎动物身体中最重要的一个器官,主要功能是为血液流动提供压力,把血液运行至身体各个部分。心脏由心肌构成,左心房、左心室、右心房、右心室四个腔组成。左右心房之间和左右心室之间均由间隔隔开,故互不相通,心房与心室之间有瓣膜(房室瓣),这些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心脏的作用是推动血液流动,向器官、组织提供充足的血流量,以供应氧和各种营养物质,并带走代谢的终产物(如二氧化碳、无机盐、尿素和尿酸等),使细胞维持正常的代谢和功能。心肌细胞呈菱形、多边形等不规则形状;细胞培养2h后开始贴壁,呈梭形;到12h左右,细胞开始伸出伪足,呈菱形、多角形;细胞分离培养48h以后,大部分伸出伪足、呈巴掌状,部分心肌细胞会出现搏动;心肌细胞为终末分化细胞,在体外不增殖。体外培养的心肌细胞可保持结构及功能上的某些特点,并具有自发性节律搏动,且心肌细胞的培养具有简便、定量、重复性好以及不受神经体液因素的影响等特点。利用培养的心肌细胞在探索非血液动力学因素所致的心肌肥厚的调节,研究心肌细胞的生物力学、凋亡、受体下调、缺血预处理、信号通路、对作用于心脏的新药进行筛选并对其安全性进行评价以及从培养的心肌细胞中提取有价值的生物因子等方面具有广阔的应用前景,对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 5.方法简介: ()实验室分离的大鼠心肌细胞采用胶原酶-联合消化法结合差速贴壁法,并用化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。 6.质量检测: ()实验室分离的大鼠心肌细胞经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 7.培养信息: 包被条件PLL(0.1mg/ml) 培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 产品货号CM-R073 换液频率每2-3天换液一次 生长特性贴壁 细胞形态梭形、多角形 传代特性属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群 消化液0.25% 培养条件气相:空气,95%;CO2,5% |
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
人乙酰肝素(HPA)免疫试剂盒现货供应
小鼠B细胞淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫试剂盒进口、分装
山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒进口、组装
人胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)免疫试剂盒进口、分装
人羟甲基戊二酸单酰辅A还原(HMG-CoAR)免疫试剂盒*直销
人抗磷壁酸抗体(TA)免疫试剂盒*直销
人富组蛋白(histatin-5)免疫试剂盒*直销
人β,β胡萝卜素9',10'加氧(BCO2)免疫试剂盒*直销
犬(Cortisol)免疫试剂盒进口、组装
绵羊3-硝基ows\system32\EhSt
大鼠心肌细胞Tomato Ringspot Virus(ToRSV)番茄环斑病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CDKN2B/p15 INK4b 细胞周期蛋白依赖性激抑制剂2B抗体 规格: 0.2ml
Rhizoma smilacis glabrae土茯苓PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周APP695 (CT) 淀粉样肽前体蛋白抗体(C端) 规格: 0.1ml
Porcine rotavirus group C猪轮状病毒C群RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周HSD3B7 滋养层细胞抗原3β7抗体 规格: 0.2ml
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV-1M-C)人免疫缺陷病毒1型M群C型探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周ICAM-2/CD102 细胞间粘附分子-2抗体 规格: 0.2ml
Radix changii明党参染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Mouse Anti-rat IgG/RBITC 罗丹明标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.3ml
E.coli大肠杆通用LAMP试剂盒(含致病性和非致病性) 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周NXPH2 神经外营养蛋白2抗体 规格: 0.2ml
Bovine Hepervirus 2 (BHV-2)牛疱疹病毒2型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Goat Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的羊抗豚鼠IgG 规格: 0.1ml
Cortex fraxini秦皮染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周Phospho-RASGRF1(Ser929) 磷酸化Ras特异性核苷酸释放因子1 规格: 0.1ml
Rhizoma bolbostematis土贝母PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周FANCG DNA损伤修复基因XRCC9抗体 规格: 0.1ml
Porcine rotavirus group B猪轮状病毒B群RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周Phospho-MSK1 (Ser360) 磷酸化有丝分裂原和应激活化型蛋白激1抗体 规格: 0.1ml
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内*解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。