UMNSAH/DF-1鸡胚胎成纤维细胞

商品介绍：

公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗，仅可用于工业或科研等非医疗目的。

细胞冻存注意事项：
(1)  细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2)  保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3)  细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4)  储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。

公司正在出售的产品：

CRB2蛋白抗体　英文名；CRB2微管相关蛋白2单克隆抗体　英文名；MAP2

CRB3蛋白抗体　英文名；CRB3微管相关蛋白2抗体　英文名；MAP2

CREB3L4单克隆抗体　英文名；CREB3L4微管相关蛋白4抗体　英文名；MAP4

CREB结合蛋白p300抗体　英文名；微管相关蛋白9抗体　英文名；MAP-9

CREB结合蛋白抗体　英文名；KAT3A / CBP微管相关蛋白EB家族3抗体　英文名；EBF3

CREB调节转录激活因子3抗体　英文名；CRTC3微管相关蛋白NICN1抗体　英文名；NICN1

CREB转录共激活因子TORC2抗体　英文名；TORC2微管相关蛋白Tau-4单克隆抗体　英文名；Human Tau

CRISPR/Cas9单克隆抗体　英文名；Cas9微管相关蛋白Tau-4抗体　英文名；Tau-4

Crk p38抗体　英文名；CRK微管相关蛋白α6抗体　英文名；TUBA1C

CRMP2单克隆抗体　英文名；CRMP2微管相关蛋白单克隆抗体　英文名；Tau

CROC4抗体　英文名；CROC4微管相关蛋白抗体　英文名；Tau

CRX抗体　英文名；CRX1微管相关蛋白轻链3C抗体　英文名；LC3C

CRYM蛋白抗体　英文名；mu Crystallin微管相关蛋白亚型4单克隆抗体　英文名；Tau isoform 4

UMNSAH/DF-1鸡胚胎成纤维细胞C-SKI抗体　英文名；SKI微管相关蛋白样蛋白3抗体　英文名；EML3

CSMD1抗体　英文名；CSMD1微管相关末端结合蛋白2抗体　英文名；EB2

CSMD2蛋白抗体　英文名；CSMD2微管相关同源蛋白TPX2单克隆抗体　英文名；TPX2

CSMD3蛋白抗体　英文名；CSMD3微管相关同源蛋白TPX2抗体　英文名；TPX2

操作步骤:

(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。

(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)

A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。

B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。

分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。

(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。

(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。

(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。

(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。