PCR的反应条件：
因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。
◇ 循环次数
根据模板DNA的量以及扩增片段的大小，设定25～30个循环。
如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，则会出现Smear。
◇ Anneal以及Extension
合适的Anneal温度通常在45～68℃之间 (预备实验可2℃间隔进行)。另外，由于在60～68℃间，也有很高的活性, 因此可在此温度范围内设定Anneal-Extension温度, 进行2 Step PCR。Anneal-Extension温度为68℃ 时，每kbp大体可设定30秒～1分钟；当温度设定在68℃以下时, 时间设定可稍长一些。通常，Anneal温度太高，有时会得不到扩增产物；Anneal温度太低时，容易发生非特异性反应。另外，Extension时间太短时，会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成；而Extension时间太长时，会出现Smear。
参数规格：
产品名称：牛BGH基因核酸检测试剂盒
产品规格：50T
产品货号：FS-P10519
产品分类：荧光PCR法
产品运输：低温运输
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输：低温、避光，快递免费送货上门。
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。
b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。
实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的：
1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。
2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性*定量方法，已得到的*，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
-813℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
NCYC132培养基: CM0077模式菌株: no种属: Schizosaccharomyces│pombe提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 28-30℃ -80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
嗜冷假单胞菌待定模式菌株: no土壤/南极土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 33生长条件: 20-25℃
粪壳培养基: 0014模式菌株: no华山松疱锈病感病植株树皮提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 25℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
AS4.1278=JCM3328=NRRLB-16696模式菌株模式菌株: no种属: Micromonospora│nigra提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0014生长条件: 28C
匈牙利隐球酵母生长条件: 25-30℃培养基: 13土壤提供形式: 斜面培养物模式菌株: no 真空冷冻干燥法
冷杆菌培养基: 848模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 20℃ 真空冷冻干燥法
-814℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
埃希氏菌培养基: 0002分解提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 30℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
上升岛链霉菌培养基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 30℃ 真空冷冻干燥法
HBUM171132模式菌株: no安全等级: 1种属: Streptomyces│sp.土壤提供形式: 冻干物培养基: 0012生长条件: 28℃
A3=CECT5855=DSM16094=LMG22090培养基: 471模式菌株，用于分类学研究。种属: Salipiger│mucosus提供形式: 冻干物模式菌株: yes生长条件: 25℃ 液氮超低温冻结法；-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法
印度斯塔普氏菌潜在的有机污染物降解菌/分离自石油降解菌群模式菌株: no水样/表层海水提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 745生长条件: 28℃
枯草芽孢杆菌枯草亚种生长条件: 30℃培养基: 0002提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
-815℃冰箱冻结；真空冷冻干燥
小单孢菌属菌种Tem3抑制剂；双功能酶抑制剂模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0027生长条件: 28C
2-(2-基噻唑-4-基)乙乙酯 1,4-噻恶烷 1,4,8,12-四氮杂环十五烷
2-丙基化硅烷 轮环藤宁
亚异丁酯 正三十四烷 四烯丙氧基乙烷
1-甲基引唑-5-硼 四十四烷 十溴二乙烷
2-NITROPHENYL PHENYL SULFIDE 2-硝基二 4171-83-9
12-Crown-4 12-冠醚-4 294-93-9
Dibenzo-18-crown-6 二并-18-冠-6-醚 14187-32-7
4-METHOXY-3-(TRIFLUOROMETHYL)BROMOBENZENE 4-溴-2-(基)甲醚 1514-11-0
大鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血管活性肠肽(VIP)免疫试剂盒 Human VIP ELISA Kit
人抗Ku抗体(ai-Ku-Ab)ELISA试剂盒 ，英文名： ai-Ku-Ab ELISA Kit
RatLeptospiraIgG,LepIgGELISA试剂盒大鼠钩端螺旋体IgG(LepIgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISA试剂盒人粒集落刺激因子(G-CSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanLactoferrin，LTF/LFELISAKit人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒规格：96T/48T
牛BGH基因核酸检测试剂盒瑞香素486-35-1中文别名：祖师麻甲素
英文名：Daphnetin
登录号：486-35-1
分子式：C9H6O4
分子量：178.14
分子结构：
外观：类白色或灰白色粉末
规格：20mg/支
纯度：≥ 98%
用途：用于含量测定/鉴定/药理实验等
提取来源：瑞香属植物长白瑞香(Daphne Korean Nakai)
溶解性：中略溶，在乙醇中微溶，在水中不溶
熔点：262-264℃
药理药效：其药理活性极为广泛，包括对疟原虫的作用、杀菌作用、抑制蛋白激酶、抗溶血和抗脂质膜过氧化作用、拮抗伯安奎、奎宁引起的溶血反应等。临床上主要用于治疗各种关节炎、血栓闭塞性脉管炎和心绞痛等。
贮存条件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
