产品介绍:
用途: 适用于细胞涂片、细菌等染色 注意事项: 主要由瑞氏染色液、磷酸盐缓冲液组成,细胞质呈红色,细胞核及细菌呈蓝色,嗜酸性颗粒呈橘红色。 储存条件:室温,24个月 |
中文名称:瑞氏染色液(Wright stain)
英文名称:
产品规格:2×100ml|2×500ml
货号:FS-X10098
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
哈茨木霉CD299抗体Human SCARB2 (Lysosome membrane protein 2) 人β胶原交联(bCTx)免疫试剂盒
云芝栓孔菌 (变色栓菌)双特异性蛋白磷6/丝裂原活化蛋白激磷3抗体Human SFMBT1 (Scm-like with four MBT domains protein 1) 人β-肌动蛋白(β-actin)免疫试剂盒
假单胞菌磷脂蛋白受体Dab1抗体Human RRNAD1 (Protein RRNAD1) 人β-黑色激(β-MSH)免疫试剂盒
罗伊氏乳杆菌磷化磷脂蛋白受体Dab1抗体Human SESTD1 (SEC14 domain and spectrin repeat-containing protein 1) 人β甘露糖(β Manase)免疫试剂盒
大斑凸脐蠕孢同源转录因子DLX2抗体Human SECISBP2L (Selenocysteine insertion sequence-binding protein 2-like) 人β-防御3 免疫试剂盒
喜乳糖拟泡囊担孢酵母桥粒糖蛋白2/桥粒糖蛋白3抗体Human RMI2 (RecQ-mediated genome instability protein 2) 人β-防御2 免疫试剂盒
谷棒杆菌Ⅲ型桥粒糖蛋白1抗体Human S100PBP (S100P-binding protein) 人β防御104(DEFB104A)免疫试剂盒
大肠埃希菌肌动蛋白解聚因子19抗体Human MSRB1 (Methionine-R-sulfoxide reductase B1) ELISA KIT人β-防御1(DEFB1)免疫试剂盒
黑附球菌动力蛋白激活蛋白1抗体Human SAC3D1 (SAC3 domain-containing protein 1) 人β淀粉状蛋白A4 免疫试剂盒
无花果曲霉桥粒芯糖蛋白1Human RTBDN (Retbindin) 人β-淀粉样前体蛋白(β-APP)免疫试剂盒
锈赤蜡黄链霉菌胞浆动力蛋白轻链1抗体Human RHEBL1 (GTPase RhebL1) 人β淀粉样多肽42(Aβ 42)免疫试剂盒
膜醭假丝酵母背根神经节同源蛋白DRGX抗体Human RHOT1 (Mitochondrial Rho GTPase 1) 人β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)免疫试剂盒
碱线菌属DeltaD抗体Human AHR(Aryl hydrocarbon receptor) 人β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)免疫试剂盒
Rhizobium multihospitium 神经特异性转录因子DAT1抗体Human RD3 (Protein RD3) 人β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)免疫试剂盒
甘蔗生节棱孢对接蛋白3抗体Human RASAL1 (RasGAP-activating-like protein 1) 人β半乳糖(βGAL)免疫试剂盒
根瘤菌DCN1样蛋白2抗体Human RRAD (GTP-binding protein RAD) 人β基己糖A(β-Hex A)免疫试剂盒
猪链球菌Streptococcus│suis 质量规格:100µg/mL,,基体:1%HNO3儿茶没食子
地衣芽孢杆菌Bacillus│licheniformis 质量规格:1000μg/ml in 10%HCl单咖啡酰
戊糖乳杆菌Lactobacillus│pentosus 质量规格:1000μg/ml小檗
瑞氏染色液(Wright stain)酿酒酵母 α,ω-双{2-[(3-羧基-1-氧基)氨基]乙基}聚乙二鞘磷脂
酿酒酵母 2,5-二溴苯甲酯酰ACP硫酯
塔宾曲霉 异基化镁化锂络合物磷脂二酰甘油酰基转移
微黄大洋芽孢杆 2--4-甲基三氟甲苯二酰甘油转酰
戈登氏属 2,3,3-基-3H-苯并[g]色C氧化
灰树花2号 硫钇(III),八水半胱合成
马赛 硫锌,一水肌加氧
花楸盘多毛孢 3-溴-7-氮杂肌加氧
Pseudomonas koreensis Kwon et al. 铟粒
蜡样芽孢杆 3,5-二庚酮β-伴球蛋白
巴斯德驹形氏酵母 3-马来酰亚基伴球蛋白
巴西果小克银汉霉 4-氨基烟水苏糖
根瘤 2-(3,4-二甲氧基苯基)乙棉籽糖
绿毛壳拟毛梭孢变种 5-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyr脱落抗体
枯草芽孢杆 ADA 单钠盐脂质过氧化物