线粒体提取试剂盒正在热销的产品：ACTH (1-39) 促肾上腺皮质激(1-39)抗体苯 无水级, 99.8%
ACTH (18-39) 促肾上腺皮质激ACTH(18-39)抗体叔丁
ACTH (7-23) 促肾上腺皮质激ACTH (7-23)抗体4-叔丁吡啶 98%
Actin alpha 肌动蛋白α抗体邻苯二丁苄酯
Actinin alpha 4 α-辅肌动蛋白4抗体苯 Stan
中文名称：线粒体提取试剂盒
英文名称：
产品规格：50T|100T
货号：FS-X9678
产品介绍:
线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。 操作步骤： 1. 样本处理： a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次; b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800g离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5×107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次。 2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000g 离心5 min。 3. 取上清，转移至新的离心管中，4℃，1000g再次离心5 min。 4. 取上清，转移至新的离心管中，4℃， 12,000 g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。 5. 往线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000 g 离心5 min。 6. 取上清，转移至新的离心管中，4℃， 12,000 g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底。 7. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。 储存条件：-20℃ |
培养操作步骤：
1．公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告：
一、分离与培养： 1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小； 2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置； 3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织*被消化； 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养； 5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养； | 二、免疫荧光鉴定： 1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min； 2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min； 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜； 5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h； 6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。
8、结果分析
a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
循环免疫复合物(CIC)英文名：CIC 锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体包装500g
血小板因子4(PF-4/CXCL4)英文名：PF-4/CXCL4 锚蛋白重复结构域蛋白22抗体包装1g
血小板因子3(PF-3)英文名：PF-3 锚蛋白重复结构域蛋白50抗体包装1g
血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)英文名：PDGFsR-α 氢离子转运ATP合成6G抗体包装5g
血小板衍生生长因子CC(PDGF-CC)英文名：PDGF-CC 锚蛋白重复结构域蛋白26抗体包装5ml
血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)英文名：PDGF-BB 锚蛋白重复结构域蛋白26抗体包装100mg
血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)英文名：PDGF-AB 型肝炎病核结合蛋白-1抗体包装1g
血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)英文名：PDGF-AA 芳香基硫酯K抗体包装100MG
血小板生长因子(PDGF)英文名：PDGF 神经元突触前膜蛋白抗体包装50MG
血小板生成(TPO)英文名：TPO 锚定蛋白G抗体包装25g
血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)英文名：GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体包装5g
血小板活化因子(PAF)英文名：PAF 整合样金属蛋白与凝血1型抗体包装1g
血小板反应蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)英文名：TSP-1 整合样金属蛋白与凝血1型-7抗体 (N端抗体)包装250mg
血纤蛋白原降解产物(FDP)英文名：FDP 整合样金属蛋白与凝血1型-7抗体包装5g
血纤蛋白原γ链(FGG)英文名：FGG 内收蛋白抗体包装250mg
磷化芳香N-乙酰化转移抗体白介2(IL2)XL413 hydrochloride 是一种有效的，选择性的，ATP 竞争性的 Cdc7 抑制剂，IC50 值为 3.4 nM，同时对 CK2 和 PIM1
线粒体提取试剂盒枝状枝孢 根皮Delta-like ligand 1
中国节丛孢 邻甲氧基肉桂Delta-like ligand4
麦氏交替单胞 N-Cbz-L-组酸Dickkopf 1
嗜管欧文氏 4-溴-3-甲酸甲酯DLEC1
猪丹丝 2-甲氧基-5-氟尿啶DNA甲基转移1
棒曲霉 4-氟-2-DNA修复基因XRCC1
变平滑假丝酵母 二苄基二硫代氨酸锌D二聚体
黑木耳8808 2,6-二硫酸盐D-乳酸
空肠弯曲杆 4-乙酰氨-2,2,6,6-四甲基-1-氧D-乳酸盐
酿酒酵母 4-氨基-2,2,6,6-四甲基氧自由基D-天冬氨酸
高粱生平脐蠕孢 5-溴戊酸乙酯D-天冬氨酸氧化
粪肠球 5-溴-2-氟EB病衣壳抗原IgA
彩色豆马勃 反式-1,2-环己二Endoglin
黑曲霉 叔戊钠ENOSF1基因
大肠埃希氏 3,5-二氨基-6-吡-2-羧酸甲酯膜外核苷酸焦磷酸；磷酸二酯家族成员2
