中文名称:增强革兰氏染色液
英文名称:
产品规格:4×10ml|4×100ml|4×250ml
货号:FS-X10102
产品介绍:
用途: 革兰氏细菌染色 注意事项: 经典革兰染色法,主要由:结晶紫染色液、碘液、脱色液、复红染液组成。染色结果为:菌体呈紫红色。 储存条件:室温,避光,12个月 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
产黄青霉双甲基精水解2抗体Human PAFAH1B1 (Plaet-activating factor acetylhydrolase IB subunit alpha) 人T表面糖蛋白CD1a(CD1A)免疫试剂盒
绿色木霉D酪激衰减蛋白1抗体Human PSKH1 (Serine/threonine-protein kinase H1) 人T淋巴白血病病Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗体免疫试剂盒
假单胞菌双特异性酪磷化调节激3抗体Human LAMA3(Laminin subunit alpha-3) 人TU3A蛋白(TU3A)免疫试剂盒
栓菌肌营养蛋白α抗体Human PPME1 (Protein phosphatase methylesterase 1) 人Trem样转录因子1(TREML1)免疫试剂盒
三叶草根瘤菌多巴β羟化抗体Human PXDC1 (PX domain-containing protein 1) 人Traf2结合蛋白(T2BP)免疫试剂盒
链霉菌抑癌基因抗体Human PCBP1(Poly(rC)-binding protein 1) 人Toll作用蛋白(TOLLIP)免疫试剂盒
耐辐射奇球菌DNA甲基转移1抗体Human KCTD13 (BTB/POZ domain-containing adapter for CUL3-mediated RhoA degradation protein 1) 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)免疫试剂盒
考克氏菌DNA甲基转移-3α抗体Human PCGF1 (Polycomb group RING finger protein 1) 人Toll样受体7(TLR7)免疫试剂盒
酿酒酵母DNA甲基转移-3β抗体Human PRDM1 (PR domain zinc finger protein 1) 人Toll样受体6(TLR6)免疫试剂盒
番鸭细小病死亡受体3抗体Human PAQR5 (Membrane progestin receptor gamma) 人Toll样受体5(TLR5)免疫试剂盒
绿毛壳死亡受体4抗体Human MOCOS(Molybdenum cofactor sulfurase) 人Toll样受体4(TLR4)免疫试剂盒
单增李斯特氏菌精神分裂症易感基因抗体Human DHTKD1 (Probable 2-oxoglutarate dehydrogenase E1 component DHKTD1, mitochondrial) 人Toll样受体3(TLR3)免疫试剂盒
河流杆菌蓬乱蛋白1抗体Human PROKR1 (Prokineticin receptor 1) 人Toll样受体2(TLR2)免疫试剂盒
链格孢(可订购)肌Dystrobrevin β蛋白抗体Human PIPOX (Peroxisomal sarcosine oxidase) 人Toll样受体1(TLR1)免疫试剂盒
孢小克银汉霉轮生变种异常凝血原/脱-γ-羧基凝血原抗体Human ADCYAP1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide) 人TH糖蛋白(THP)免疫试剂盒
普氏粪杆菌结蛋白抗体Human PROSER1 (Proline and serine-rich protein 1) 人TGF-β诱导早期基因1(TIEG1)免疫试剂盒
ATCC16358=CBS281.34资源名称: 紫红曲霉 质量规格:1000μg/ml;溶剂:1.5mol/L硝安五酯
毛壳Chaetomium│sp. 质量规格:1000μg/ml,介质:0.05mol/L NaOH连翘脂
木贼镰刀菌Gibberella│intricans Wollenw. 质量规格:1000μg/ml桃叶珊瑚
增强革兰氏染色液嗜热链球 2-(甲基)-3,4-二甲氧基吡啶 盐盐赤霉19
勒氏寡食单胞 2-(1-基)苯赤霉20
苹果交链孢 腺-5'-二磷单盐二水合物酮磷双激
阪崎肠杆 N-(3-氨基基)甲基烯盐 盐盐草氧化
枯草芽孢杆 (S)-吡咯烷-3-甲转运蛋白
嗜热脂肪地球芽胞杆 5-溴-2-羧二氢黄酮4-还原
微小毛霉 3--2-氟-5-(三氟甲基)吡啶脆裂病
绿针假单胞 喹啉-5-羧6-磷葡萄糖
斯氏假单胞 4-三氟甲基硫代苯甲酰6-磷果糖
日本根霉 (S)-5-溴甲基-2-吡咯烷酮环斑病
球形赖芽孢杆 [1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二化钯南方菜豆花叶病
蜡磨属 N,N-二甲基烯基脲(DMPU)南芥菜花叶病
黑曲霉 二苯基硝盐酪蛋白激3
枯草芽孢杆 3--4-氟苄组蛋白H3.2
拟黑马朗假丝酵母 甘-DL-苯tubby蛋白