培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:橘黄G6染色液
英文名称:
产品规格:100ml|500ml
货号:FS-X9908
产品介绍:
用途: 细胞学样本常规染色,尤其适用于妇科细胞学涂片染色、细胞脱落标本染色。 注意事项: OG6与EA50或EA36联合使用,可以将细胞浆染成鲜明的绿色、蓝色、粉色。注意密闭干燥保存。 储存条件:室温,12个月 |
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
蒂盖姆头珠霉肌侧索硬化症相关蛋白2(2号染色体)抗体Human IFIT2 小鼠抗甲状腺过氧化物抗体(TPO-Ab)免疫试剂盒
相思根瘤菌三磷腺柠檬裂解抗体Human ICA1L 小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMA IgA)免疫试剂盒
那波链霉菌β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体Human ICAM2(Intercellular adhesion molecule 2) 小鼠抗环胍肽抗体(Anti-CCP-antibody)免疫试剂盒
谷棒杆菌内收蛋白a1抗体Human ICT1 小鼠抗核小体抗体(IgG)免疫试剂盒
平菇α2纤溶色上皮衍生因子抗体Human IFT81 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)免疫试剂盒
罗尔细薄菌膜粘连蛋白7抗体Human ICK 小鼠抗核抗体IgG 免疫试剂盒
根腐平脐蠕孢早老γ分泌抗体Human IFT80 小鼠抗弓形虫抗体(IgG)免疫试剂盒
布氏乳杆菌钠ATP蛋白a1抗体Human IFIT3 小鼠抗弓形虫IgM抗体免疫试剂盒
psilent-dual1(pSD1)Rho鸟交换因子2抗体Human IFT88 小鼠抗单核抗体(AMA)免疫试剂盒
哈氏弧菌磷化Rho鸟交换因子2抗体Human IFITM2(Interferon-induced transmembrane protein 2) 小鼠抗促甲状腺受体抗体(TRAb)免疫试剂盒
铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)*去整合样金属蛋白9抗体Human IFIT5 小鼠抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫试剂盒
产色葡萄球菌艾滋病病制约锚定蛋白抗体Human IFITM1(Interferon-induced transmembrane protein 1) ELISA Kit小鼠抗Smith抗体(Sm)免疫试剂盒
变异盐单胞菌腺环化1抗体Human IFNA6 小鼠抗IVIgG抗体免疫试剂盒
裂褶菌核糖核L抑制蛋白抗体Human IFRD1 小鼠抗IgE受体抗体免疫试剂盒
沙壤土杆菌Rho GTP激活蛋白24抗体Human IFRD2 小鼠卷曲螺旋域结合蛋白80(CCDC80)免疫试剂盒
东方伊萨酵母GTP激活蛋白ASAP3抗体Human IFI30 小鼠巨噬移动抑制因子(MIF)免疫试剂盒
泊库岛食烷菌Alcanivorax│borkumensis 质量规格:BR白介18结合蛋白试剂盒商陆皂乙
镰孢属Fusarium│sp. 质量规格:>98%,BR白介18试剂盒丝石竹皂元3-O-B-D葡萄糖酯
厦门海旋菌Thalassospira│xiamenensis 质量规格:>98%,BR白介17F试剂盒松香
橘黄G6染色液冷海水黄杆 2'-OMe-Bz-C亚磷酰单体磷脂酰肌激-3催化亚基α基因
杏鲍菇 磺化酞菁钴(II)p110α
乳酒假丝酵母 培叔丁盐白介10
侧耳 N-苯甲酰基-5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-[(叔丁基)二甲基硅基]腺-3'-低密度脂蛋白-胆固
蜡蚧 瑞格非尼一水合物色P4503A5
酿酒酵母 5-降烯-2-羧乙酯谷氨酰转肽
绣球* 硫代硫镁六水化合物组织型激肽释放
根瘤属 N-乙酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-2'-脱氧胞胃蛋白原
黑腐皮壳 5-酮基-2-甲氧基苯磺酰甲状腺球蛋白IgG抗体
枯草芽孢杆 4-甲酯游离雌三
黑曲霉 正癸基乙酯鹦鹉衣原体IgG
土生类诺卡氏 齐留通结膜静脉曲张IgG
链霉 2-辛炔甲酯结膜静脉曲张IgM
无花果曲霉 氧锑沙门氏IgG抗体
黑曲霉 4-(4-硝基苄基)吡啶沙门氏IgM抗体
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)