中文名称:鞭毛染色液(Cerares-Gill法)
英文名称:
产品规格:2×50ml
货号:FS-X10162
产品介绍:
用途: 又称西萨-基尔染色法,主要适用于不易染色的细菌鞭毛、产生胶质较多的植物病原细菌以及鞭毛很细且容易脱落的细菌。 注意事项: 细菌鞭毛是细菌的运动器官,幽门螺杆菌能够从强酸性的胃内腔穿过胃上皮细胞上的黏液层达到胃上皮细胞的中性环境,这就是鞭毛运动作用的很好例证。通过鞭毛染色,可以观察到鞭毛形态、数量和鞭毛在菌体分布的位置,鞭毛数量和在菌体上的分布位置是鉴定细菌的重要依据之一 储存条件:室温,避光,12个月 |
培养操作步骤:
1.公司仅用于科研用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验报告:
一、分离与培养: 1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小; 2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置; 3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化; 4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养; 5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养; | 二、免疫荧光鉴定: 1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min; 2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min; 4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜; 5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h; 6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。 |
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
香菇延伸突触蛋白3抗体Human ZNF253 鸡热休克蛋白40(HSP-40)免疫试剂盒
鸭疫里氏杆菌原纤维蛋白2抗体Human ZNF24 鸡热休克蛋白27(HSP-27)免疫试剂盒
滑菇尤文肉瘤FLI1蛋白抗体Human ZNF251 鸡热休克蛋白20(HSP-20)免疫试剂盒
链霉菌岩藻糖转移1抗体Human ZNF256 鸡去甲肾上腺(NA)免疫试剂盒
土曲霉凋亡调节蛋白δ+γ抗体Human L1CAM(Neural cell adhesion molecule L1) 鸡前列腺F2α(PGF2α)免疫试剂盒
球毛壳菌叉头蛋白O1/O3/O4抗体Human ZMAT2 鸡前列腺E2(PGE2)免疫试剂盒
婴儿配方乳粉化物 微管相关蛋白FAM82B抗体Human ZIC4 鸡皮质/肾上腺(CORT)免疫试剂盒
越南芽孢杆菌纤维蛋白原A链抗体Human ZNF134 鸡免疫球蛋白M(IgM)免疫试剂盒
鼠李糖乳杆菌FAS凋亡抑制分子1抗体Human PCGF6(Polycomb group RING finger protein 6) 鸡免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒
鲁氏不动杆菌FAS凋亡抑制分子2Human ZKSCAN3 鸡免疫球蛋白E(IgE)免疫试剂盒
针叶树散斑壳表皮表面抗原1抗体Human ZIM3 鸡免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒
固氮菌9抗体Human ZNF140 鸡免疫核糖核(Irna)免疫试剂盒
粗皮马勃10抗体Human ZIP4 鸡马立克氏病病(MDV)抗体(IgM)免疫试剂盒
酿酒酵母11轻链抗体Human ZNF143 鸡马立克氏病病(MDV)抗体(IgG)免疫试剂盒
紫红曲霉12重链抗体Human ZIP7 鸡卵转铁蛋白(OT)免疫试剂盒
苏云金芽胞杆菌FIGNL1蛋白抗体Human ZKSCAN1 鸡卵清白蛋白免疫试剂盒
肺炎克雷伯菌肺炎亚种Klebsiella│pneumoniae 质量规格:1000μg/ml,溶剂:齐墩果-3-O-β-D葡萄糖( 1→3
解淀粉芽孢杆菌解淀粉亚种Bacillus│amyloliquefaciens subsp. amyloliquefaciens 质量规格:1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3黄花败酱甙C;牡丹草B
烟曲霉Aspergillus│fumigatus 质量规格:100.0μg/g,基体: 0.5mol/L的HCl溶液五味子
鞭毛染色液(Cerares-Gill法)黄硬皮马勃 十三烷二二氢新喋呤缩
毛柄(金针菇) 2--5-三氟-3-甲二氢还原
狂犬病参考疫苗 2--5-三氟-4-甲二氢合成
巨型艾美耳球虫 2--5-三氟甲基-4-吡啶DHN-P3焦磷
中国台湾根霉 N-(2-乙基)吡咯烷脂肪氧化
黄赭色链霉 阿替林性蛋白
鸭疫里氏杆 4-(吡啶-3-基)-4-黄瓜绿斑驳病
胶孢 3-异喹啉甲乙酯喹啉磷核糖基转移
枯草芽孢杆 1,3,5-三(4-羧基苯基)苯性β葡萄糖
耐辐射薄层 3-氨基-5--2-羟基甲酯水杨羧基转移
多根硬皮马勃 4--1-甲基-1H-咪唑[4,5-C]吡啶α-1抗胰糜蛋白
镰孢霉 2-氨基-5-羟基-4-甲氧基甲酯胰蛋白抑制因子
Chryseobacterium lathyri 2,6-二甲基5核
红球 4-氨基-2,5-二肌半乳糖合成
高山被孢霉 3-羟基α-葡萄糖