培养操作步骤 :
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
商品属性:
产品名称 | 规格 | 货号 |
1×10⁶cells/T25培养瓶 | BJ-X96883 |
商品介绍:
名称 HMEC-1 (微血管内皮细胞) 别称Hmec-1; HMEC1; CDC/EU.HMEC-1; Human Microvascular Endothelial Cell line-1 年龄(性别)男;新生儿 组织来源微血管内皮 生长特性贴壁细胞 细胞形态上皮细胞样 背景描述Microvascular endothelial cells isolated from human foreskins were transfected with pSVT vector, a pBR-322 based plasmid containing the coding region for Simian virus 40A gene product, large T antigen. 生物安全等级2 生长培养基Complete Growth Medium for HMEC-1 推荐传代比例1:3-1:5 推荐换液频率2~3次/周 冻存条件 冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
实验要点及说明:
1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;
2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃制造,并经过铬酸洗液处理;
3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;
4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;
5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等;
适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。
甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) (变性)
甲型流感 H11N9
HMEC-1 (微血管内皮细胞) 2 ug pYFP-Gogi pYFP-Gogi 低温运输,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
1袋 显影粉 Developing Solution,Powder 室温避光保存 0.312-20 ng/mL 人衰变加速因子(DAF/CD55)ELISA试剂盒
1瓶 NCI-H446株 NCI-H446 低温运输和保存
PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液(2015药典) Buffered Sodium Chloride – Peptone Solution 250g
多价蛋白胨-酵母膏(PY)培养基 Poly Peptone Yeast Extract Medium 250g 15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human 2', 3'-cyclic-nucleotide 3'-phosphodiesterase
100mL Kinase Storage Buffer Kinase Storage Buffer 常温保存 0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Leucine-rich alpha-2-glycoprotein
30次 一站式蛋白质非变性PAGE套装(高pH 缓冲液套) One-Stop Protein Native PAGE Pack 常温保存(上样液需要-20℃保存) 15.6-1000 pg/mL 人补体成分9(C9)ELISA试剂盒
100g 钾 Potassium Hydrogen Posphate 室温保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human TN-C
1%NaCl蔗糖 20支类杆菌-胆汁-七叶甙(BBE)琼脂进口、国产BBE Agar用于脆弱拟杆菌群的分离培养250
250mg 潮B干粉 Hygromycin B Powder 4℃避光保存 0.156-10 ng/mL 人磷脂爬行1(PLSCR1)ELISA试剂盒
2 ug pPICZ C pPICZ C 低温运输,-20℃保存 15.6-1000 pg/mL 人胰弹性蛋白(ELA1)ELISA试剂盒