公司所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗，仅可用于工业或科研等非医疗目的。
产品名称 | 货号 | A01X884 | |
规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 | 英文名 | NCIH2452:NCI-H2452 |
分类 | 人细胞系 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
商品介绍：
别称 | H2452 |
种属 | 人类 |
年龄（性别） | 男性 |
组织来源 | 疾病：间皮瘤 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
详情简介 | NCI-H2452 [H2452]细胞是于1990年11月建株，组织提供者不抽烟。 |
生物安全等级 | 1 |
生长培养基 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~48小时 |
冻存条件 | |
冻存液 | 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO |
温度 | 液氮 |
培养条件 | |
气相 | 空气，95%；CO2，5% |
温度 | 37℃ |
细胞冻存注意事项：
(1) 细胞的收获
用来冻存的细胞一般选择在细胞约铺满 90% 的时候，这时细胞生长状态好，细胞数量也多，并且在收获细胞前 24 小时换一次培养液。收获用来冻存的细胞开始时方法和平时一样，用 100xg 离心 5 分钟收集细胞再重悬，活细胞记数。稀释或浓缩到细胞保存的最终细胞浓度的二倍(一般是 400-1000 万 细胞 /ml )，加入已经配好的等体积的培养液保护剂混合溶液中轻轻混匀，分装到冻存管，冷冻保存。
(2) 保护剂的使用
细胞冻存中， 一般使用DMSO 作为保护剂。在细胞冻存中， DMSO 使用的最终浓度一般是 5-15% ，某种具体细胞的冻存液中的DMSO浓度可以从ATCC查到。对特别敏感的细胞特别是杂交瘤细胞在冻存时使用 95% 血清和 5%DMSO 可能会好些。保护剂在使用时先用培养液或血清配成最终浓度的2倍，再与等体积的悬浮细胞的培养液混合。
(3) 细胞冻存的速率
细胞的冷冻速率最适控制在让细胞有足够的时间脱水而又不被过度脱水导致细胞损害。对大多数细胞来说，每分钟降 1 至 3 ℃是合适的。通常的操作是把细胞先在-20℃1-2个小时，再放入 -80℃冰箱过夜(如果没有-80℃冰箱，可以用干冰替代)，再转入液氮罐或低于 -130℃的冰箱长期保存。
(4) 储存环境
细胞长期保存温度是 -130 ℃或更低。液氮罐中气态层温度在 -140℃至 -180℃之间，细胞可保存在气态层或浸入液氮中，如果可能最好保存在气态层，因为这样可避免由于有液氮进入冻存管而在拿出细胞时引起爆炸(但是这样液氮罐内只能存储少量液氮，需要经常添加)。细胞也可以在-80℃冰箱保存几个月左右的时间。
操作步骤:
(1) 细胞系培养：取6cm细胞皿，向每孔中加入2mL含1~2×105个细胞培养液，37℃ CO2培养密度至40%~60%，密度过大，转染后不利筛选细胞。
(2) 转染液制备：在EP管中制备以下两液(为转染每一个孔细胞所用的量)
A液：用不含血清培养基稀释1ug 质粒DNA。
B液：用不含血清培养基稀释2ul脂质体。
分别将A液与B液轻弹混匀，静置5分钟。
(3) 吸取B液加入至A液中，轻弹混匀。室温中置10-15分钟。
(4) 转染准备：用1mL不含血清培养液漂洗两次，再加入4mL不含血清培养液。
(5) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养液中，摇匀，37℃温箱置6~24小时，吸除无血清转染液，换入正常培养液继续培养。
(6) 瞬时转染后，可在48h-72h细胞长满之后，提取细胞蛋白或者RNA，验证敲减/过表达效率。
公司正在出售的产品：
ATP结合蛋白家族5抗体 快速发育生长因子同源蛋白2抗体 英文名；Sprouty 2
ATP依赖RNA解旋酶DDX60样蛋白抗体 辣椒素受体抗体 英文名；TRPV1
Avi-Tag 单克隆抗体 酪酪肽抗体 英文名；PYY
BarX2蛋白抗体 立即早期癌基因BRLF1/鼻咽癌基因抗体 英文名；BRLF1
6号染色体开放阅读框1抗体 甲基化样蛋白11抗体（N端） 英文名；METTL11A
7号染色体开放阅读框13抗体 甲基转移酶样蛋白14抗体 英文名；METTL14
8号染色体开放阅读框31抗体 甲状腺激素受体α1+α2抗体 英文名；THRA1+2
9号染色体开放阅读框114抗体 钾电压阀门通道混合器相关亚家族成员5抗体 英文名；KCNA5
NCI-H2452人间皮瘤细胞9号染色体开放阅读框57抗体 钾离子通道多聚体结构域蛋白14抗体 英文名；KCTD14
Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白/III型胶原抗体 间隙连接蛋白10抗体 英文名；GJA10
ADCK2蛋白抗体 减数分裂同源蛋白1抗体 英文名；RMND1
AF488标记的转录因子Pax6抗体 碱性磷酸酶(组织非特异性)抗体 英文名；Alkaline Phosphatase, Tissue Non-Specific isozyme
