LIMA™是一种基于宽带可调谐激光光源的高光谱显微镜。它采用Photon etc.滤波技术，配合连续可调的单色光、高功率密度激光进行全视野照明。系统在可见光，近红外，和短波红外，都有很好的光谱分辨能力，使其能够提供接近衍射极限的空间分辨率，无论暗场、激发光谱、标准明场反射或透射成像，该系统的全光谱响应速度远超点扫描、线扫描的设备。
技术指标 | VIS | SWIR | eSWIR | VIS-SWIR |
激发光谱范围 | 400 – 1000nm
| 900 – 1620nm | 1000 – 2500nm | 400- 1620nm |
激发光谱分辨率 （FWHM） | 1.5 - 2.5nm | 3.0 - 5.0nm | < 5.0 nm | 1.5 - 5.0nm |
激发波长 | 连续可协调激光器 | 连续可协调激光器 | 连续可协调激光器 | 连续可协调激光器 |
带外抑制 | < -60 db = ± 40 纳米 | < -60 db = ± 80 纳米 | < -60 db = ± 80 纳米 | < -60 dB = ± 40 纳米 （VIS） 或 80 nm （SWIR） |
可调谐激光光源输出功率 | 2 – 4mW | 3 – 9mW | 0.5 - 8.0mW | 2 – 9mW |
照明 | 高效均匀照明；立体荧光或表面荧光，明场或暗场（油镜、干镜） | |||
空间分辨率 | 亚微米 -（与显微镜目镜数值孔径相关） | |||
相机 | sCMOS（可选CCD，EMCCD） | ZephIR™ 1.7 或者 Alizé™ 1.7 (InGaAs) | ZephIR™ 2.5 (HgCdTe) | sCMOS 和 ZephIR™ 1.7 or Alizé™ 1.7 |
显微镜 | 直立或倒置科研级显微镜 | |||
白光照明 | 透镜、反射、汞灯、卤素灯 | |||
应用案例
金纳米粒子的高光谱暗场表征:识别和定位
暗场显微镜结合高光谱成像技术，为研究组织、活细胞或溶液中的纳米材料提供了一种行之有效的方法。来自等离子体或其他纳米结构的散射光，提供了关于其组成、大小和分布的相关信息。Photon提供了两种不同的高光谱暗场成像平台:一种基于可调谐激光光源(TLS)，在激励下进行滤波和IMA图像处理，一种提供了发射滤波的平台。
可调谐激光光源系统（TLS）由两个模块组成，基于Photon etc.体布拉格光栅(VBG)技术的超连续光源(宽带光源)和激光线可调谐滤波器(LLTF -带通滤波器)。
IMA则由同样基于体布拉格光栅(VBG)技术的高光谱成像滤波器、“超立方体（hypercube）”组成。当与配备暗场电容器的科研级显微镜组合时，TLS和超立方体可以将该显微镜转换为高光谱暗场设备，这些系统在可见光范围 (400-1000 nm)， 近红外范围 (900-1620) nm或可见-近红外范围(400-1620 nm)内连续可调。该平台可以无需特殊样品制备的情况下，即可对纳米材料进行深入的表征。
TLS结果示例
在该研究中，Patskovsky等人利用高光谱暗场成像技术研究了靶向CD44+人乳腺癌细胞的金等离子体纳米颗粒(AuNPs)。该方法已成功应用于三维光谱定位和光谱分析。
“这种空间和光谱信息对于改进基于纳米等离子体的成像、复杂生物环境中的疾病检测和治疗至关重要。”
图一，使用100X物镜沿光学z轴在不同平面拍摄的暗场图像。焦平面位于
a)玻璃基板表面(S点)或b)人类乳腺癌细胞的上表面或细胞内部(C点)
Photon etc与华盛顿大学的David Ginger教授合作，利用Photon公司的高光谱暗场成像仪研究了100纳米金纳米颗粒。从432 nm到849 nm，以3 nm的步长采集散射数据。高光谱结果如图2 a)和b)显示，图c)为从数据中提取的光谱图，波长的变化可以帮助确定粒子的大小，而空间信息可以帮助评估它们的分布。
图2 - a)从高光谱数据中提取的576 nm暗场图像，b)区域放大图，c)提取的散射光谱-颜色为对应的采集点。
IMA结果示例
在École Polytechnique de Montréal的Michel Meunier教授的研究小组的这项工作中，IMA被用于表征用金纳米颗粒(AuNPs)标记的人类乳腺癌细胞。Photon公司的高通量高光谱滤光片可以快速获取高分辨率光谱图像。相机可以在视野中捕捉到整个图像，因此可以实时收集信息，并跟踪细胞和发光纳米级组件的动态。 Photon 公司的PHySpec™软件支持主成分分析功能（PCA），以识别并定位样品中的纳米颗粒。
图3a)为60 nm AuNps标记MDA-MB-23人乳腺癌细胞的暗场图像。在60倍物镜下，对150 × 112 μm2的视野区域从400 nm到650 nm成像，步长为2 nm，每个波长信号积累时间为2秒。细胞一般具有平坦的散射光谱，而金纳米颗粒AuNPs在550 nm左右有一个尖峰。图3b)为从乳腺癌的暗场高光谱数据中提取的550 nm图像。在PCA 后，金纳米颗粒用绿色标记。 (图3c)为乳腺癌细胞的放大图， (图3d)为含有AuNPs区域的光谱，证实了60 nm纳米颗粒的存在。
图3 - a) 60 nm大小的AuNps标记的人乳腺癌细胞暗场图像，b) 550 nm单色图像，PCA后的AuNps用绿色标记，c)癌细胞放大图，d)不同区域AuNps的扩散光谱(见对应图c)
