创新性的大视野
随着研究趋势向大规模系统级方法发展,对更快数据采集和更高吞吐量能力的需求不断增加。大靶面相机传感器的开发和PC数据处理能力的提高促进了这种研究趋势。Ti2具有25mm视野,提供了更高水平的可扩展性,使研究人员能够真正大靶面探测器的实用性,并在摄像头技术继续快速发展的同时,为其核心成像平台提供面向未来的能力。
在大视野里提供明亮的照明
高功率LED可在Ti2的大视野范围内提供明亮的照明,确保从高放大倍率DIC等要求苛刻的应用中获得清晰、一致的结果。加入复眼透镜的设计提供了从到边缘的均匀照明,用于定量高速成像和拼大图应用中图像的无缝拼接。
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专为大视野成像而设计的紧凑型落射荧光照明器,配备了石英复眼透镜,可在包括紫外线在内的广谱范围内提供高透射率。具有硬涂层的大直径荧光滤光片可提供具有高信噪比的大视野图像。
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大直径观察光学系统
观察光路的直径已经扩大,以便在成像端口处实现25的视场数。由此产生的大视野能够捕获传统光学器件大约两倍的面积,使用户能够从大型传感器(如CMOS探测器)中获得更大性能。
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大视野成像的物镜
具有出色图像平整度的物镜可确保从到边缘的高质量图像。利用OFN25物镜的潜力可显著加速数据收集。
用于大容量数据采集的相机
尼康FX格式F接口相机Digital Sight 50M和Digital Sight 10配备了最初为D-SLR专业相机开发的,特为研究而优化的CMOS图像传感器。可实现高速、高灵敏度的活细胞成像和Ti2大视野的有效利用。
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出色的尼康光学系统
尼康的高精度CFI60无限远光学器件,针对各种复杂的观察方法而设计,因其出色的光学性能和坚固的可靠性而受到研究人员的高度评价。
切趾相差
尼康的切趾相差物镜和可选择的幅度滤光片可显著提高对比度并减少光晕伪影,从而提供详细的高清图像。
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切趾相差板被纳入APC目标 | 用CFI S Plan Fluor ELWD ADM 40XC物镜拍摄BSC-1细胞 |
外部相差
电动外部相差系统使用户能够通过绕过使用相差物镜的需要,将相差与落射荧光成像相结合,而不会影响荧光透射。例如,非常高数值孔径的液浸物镜可用于相差成像。使用这种外部相差系统,用户可以轻松地将相差与其他成像模式相结合,包括如TIRF和激光光镊应用的弱荧光成像。
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内置相差环的目镜底座 相差环 没有相差环的物镜 | 用CFI Apochromat TIRF 100XC Oil物镜拍摄用GFP-α-微管蛋白标记的PTK-1细胞。 图像来源:Wadsworth中心的Alexey Khodjakov博士研究科学家VI和教授 |
DIC (微分干涉相差)
尼康备受推崇的DIC光学元件可在整个放大倍率范围内提供均匀清晰细致的图像,并具有高分辨力和对比度。DIC棱镜针对每个物镜单独定制,为每个样品提供高质量的DIC图像。
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与物镜相匹配的DIC棱镜安装在物镜转盘中 | DIC和落射荧光图像: 用CFI Plan Apochromat Lambda 60XC物镜和DS-Qi2相机拍摄的25mm视野的神经元图像(DAPI、Alexa Fluor® 488、罗丹明-鬼笔环肽) 图像来源:西北大学尼康成像中心的Josh Rappoport。 样品来源: 西北大学的S. Kemal、B. Wang和R. Vassar。 |
NAMC(尼康调制反差)
这是一种塑料兼容的高对比度成像技术,适用于诸如卵母细胞的未染色的透明样品。NAMC提供具有阴影投射外观的伪三维图像。用户可以容易地为每个样品调整对比度的方向。
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NAMC物镜包含可旋转调制器 | NAMC图像: 用CFI S Plan Fluor ELWD NAMC 20XC物镜拍摄的小鼠胚胎 |
自动校正环
样品厚度、盖玻璃厚度、样品中的折射率分布和温度的变化可导致球差和图像扭曲。高质量的物镜通常配备校正环以补偿这些变化。并且校正环的精确调节对于实现高分辨力、高对比度图像是至关重要的。这款新型自动校正环采用谐波驱动和自动校正算法,使用户可以轻松实现精确的校正环调整,以每次都能实现物镜的合适性能。
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谐波驱动机构,用于校正环运动的高精度控制 | 超分辨率图像(DNA PAINT): 用CFI Apochromat TIRF 100XC Oil物镜拍摄表达α-微管蛋白(绿色)和TOMM-20(品红色)的CV-1细胞。 |
落射荧光
Lambda系列物镜采用尼康的纳米结晶涂层技术,非常适合要求高、低信号、多通道荧光成像,需要在宽波长范围内进行高透射和像差校正。结合提供改进荧光检测和杂散光对策(如噪声终结器)的新型荧光过滤立方体,Lambda系列物镜证明了它们在弱信号观测(如单分子成像)甚至基于发光的应用中的能力。
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发光图像: HeLa细胞表达基于BRET的钙指示剂蛋白Nano-lantern(Ca2 +)。 样品来源:大阪大学科学与工业研究所长Takeharu Nagai教授。 |
Volume Contrast
Volume Contrast利用一系列在不同Z轴深度捕获的无标记明场图像来重构相位分布图像。
Volume Contrast图像便于细胞的识别,为自动计数和面积分析提供方便。由于该方法利用了明场成像,因此VC能够对细胞进行实时无损的分析,适用于各种应用。(仅适用于TI2-E)。
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使用CFI S Plan Fluor ELWD 20XC成像的HeLa细胞 |
Volume Contrast特征
从无标记样品中准确识别细胞,用于自动细胞计数和面积测量。
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消除半月效应对细胞鉴定的影响
由于半月效应,相差图像在培养孔边缘受到不良影响。VC避免了这一影响,使培养孔边缘的细胞能够被清晰地识别,从而增加了细胞计数精度并改进了统计数据。
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对焦
即使是成像环境中温度和振动的最轻微变化也会极大地影响对焦稳定性。Ti2使用静态和动态测量消除了焦点漂移,以便在长时间的实验中实现纳米级和微观世界的忠实可视化。
为实现高稳定性(Ti2-E)而重新进行的机械设计
为了提高对焦稳定性,Z轴驱动和PFS自动对焦机构都经过了全面的重新设计。
新的Z轴调焦机构较小,位于物镜转盘附近,可更大限度地减少振动。即使采用扩展(双层光路)配置,它仍然保留在物镜转盘附近,确保所有应用的稳定性。
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① 使在扩展配置中,高稳定性Z轴调焦机构仍保持与物镜转盘相邻 |
聚焦系统(PFS)的探测器部分已从物镜转盘上拆下,以减少物镜转盘上的机械负载。这种新设计还可以更大限度地减少热传递,从而有助于实现更稳定的成像环境。为此,Z轴驱动电机的功耗也降低了。这些机械重新设计相结合,形成了稳定的成像平台,非常适合单分子成像和超分辨率应用。
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即使在扩展配置中,高稳定性Z轴调焦机构仍保持与物镜转换器相邻。 ① PFS物镜转换器 ② PFS测量单元 |
使用PFS进行实时焦点校正:简单 出色
对焦系统(PFS)可自动校正由温度变化和机械振动引起的焦点漂移,这可能是由多种因素引起的,包括向样品中添加试剂和多位置成像。
PFS通过实时检测和跟踪盖玻片表面的位置来保持焦点。出色的光学偏移技术使用户可以轻松地将焦点保持在偏离盖玻片表面的所需位置。PFS通过内置线性编码器和高速反馈机制自动连续保持对焦,即使在长期复杂的成像任务中也能提供高度可靠的图像。
PFS兼容广泛的应用,从涉及塑料培养皿的常规实验到单分子成像和多光子成像。它还兼容从紫外到红外的各种波长,这意味着它可用于多光子和光镊应用。
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物镜自动补水装置
使用新的物镜自动补水装置可以提高使用PFS和水镜的长期成像性能。物镜自动补水装置自动将适量纯水施加于物镜的顶部,防止实验过程中浸水变干和溢出。它与所有类型的水镜兼容,有助于在长时间内稳定地提供高分辨率、高对比度和像差校正的延时图像。
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Compatible objectives
CFI Apochromat LWD Lambda S 20XC WI
CFI Apochromat Lambda S 40XC WI
CFI Apochromat LWD Lambda S 40XC WI
CFI Plan Apochromat VC 60XC WI
CFI Plan Apochromat IR 60XC WI
CFI SR Plan Apochromat IR 60XC WI
CFI SR Plan Apochromat IR 60XAC WI
精度高,质量好DIC (微分干涉相差)辅助向导
不再需要用户记忆复杂的显微镜对准和操作程序。Ti2集成了来自传感器的数据,可指导您完成这些步骤,减少用户的操作错误,并使研究人员能够专注于他们的数据。
连续显示 显微镜状态
一系列内置传感器可检测和传递显微镜中各种组件的状态信息。使用计算机获取图像时,所有状态信息都记录在元数据中,因此您可以轻松调用采集条件和/或检查配置错误。
此外,内置的相机允许用户查看后焦平面,便于校准相差环和DIC的消光十字。它还为TIRF等应用提供了激光安全对准方法。
显微镜状态可在平板中查看,也可通过显微镜前面的指示灯显示,可在暗房中轻松确认设备状态。
操作步骤向导
Ti2的辅助向导功能为显微镜操作提供了交互式逐步指导。可以在平板电脑或PC上查看辅助指南,并集成来自内置传感器和内置摄像头的实时数据。辅助向导旨在帮助用户完成实验设置和故障排除的校准程序。
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①将视场光阑图像移到视场 ②从光路上取下Bertrand透镜 ③选择观察口 |
自动检测错误 Ti2-E/A
检查模式支持用户在平板电脑或PC上轻松确认所有正确的显微镜组件是否适合他们选择的观察方法。当未实现所需的观察方法时,此功能消除了通常故障排除所需的时间和精力。当涉及多个用户时,该功能特别有利,因为每个用户都有可能对显微镜设置进行意外的改变。自定义检查程序也可以预先编程。
直观的操作
Ti2经过全面的重新设计,从整体设计到每个按钮和开关的选择和放置,为用户带来体验。即使在黑暗中,控制也很容易使用,在黑暗中进行大多数成像实验。Ti2提供直观、轻松的用户界面,因此研究人员可以专注于数据,而不是显微镜控制。
精心设计的显微镜控制布局
所有按钮和开关的位置都基于它们控制的照明类型。控制透射观察的按钮位于显微镜的左侧,控制落射荧光观察的按钮位于右侧。控制常见操作的按钮位于前面板上。这种分区的使用提供了易于记忆的布局,这是在暗室中操作显微镜时的理想特征。
① 往复式切换 (Ti2-E)
设计中融入了往复式切换,用于控制荧光滤光片转盘和物镜转盘等设备。这些类型的开关模仿手动旋转这些设备的感觉,以实现直观的控制。可以将附加功能结合到这些往复式切换中,使得单个开关可以操作多个相关设备。例如,用于荧光滤光片转盘的往复式切换不仅旋转转盘,而且当用户按下开关时也打开和关闭荧光快门。还可以对这些开关进行编程以操作发射滤光片转盘和外部相差单元。
② 编程功能按钮 (Ti2-E/A)
位置便利的功能按钮支持自定义用户界面。用户可以从100多种功能中进行选择,包括控制快门等电动设备,甚至通过I/O端口向外部设备输出信号,以进行触发采集。通过存储每个电动设备的设置,能够即时改变观察方法的模式功能也可以分配给这些按钮。
③ 调焦旋钮 (Ti2-E)
调焦加速按钮和PFS接合按钮设置在调焦旋钮附近。由于它们的不同形状,这两个按钮很容易通过触摸识别。调焦速度根据使用物镜自动调整,通过保持理想的调焦速度实现无压力操作
使用操纵杆和平板电脑进行直观控制
Ti2操纵杆不仅控制载物台的移动,还控制显微镜的大部分电动功能,包括PFS活动。它可以显示XYZ坐标和显微镜组件的状态,为用户远程控制显微镜提供了一种有效的手段。Ti2的电动功能也可以通过平板电脑控制,通过无线局域网连接到显微镜,为显微镜控制提供了一个通用的图形界面。
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