产品名称 | 原代兔软骨细胞 | 英文名称 | Rabbit Chondrocyte Cells |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 货号 | GOY-01X0835 |
组织来源 | 软骨组织 | 细胞形态 | 梭形、多角形 |
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞简介：
兔软骨分离自关节软骨组织；关节软骨属于透明软骨，表面光滑、呈淡蓝色、有光泽，它是由一种特殊的叫做致密结缔组织的胶原纤维构成的基本框架，这种框架呈半环形，类似拱形球门，其底端紧紧附着在下面的骨质上，上端朝向关节面，这种结构使关节软骨紧紧与骨结合起来而不会掉下来，同时当受到压力时候，还可以有少许的变形，起到缓冲压力的作用。在这些纤维之间，散在分布着软骨细胞，软骨细胞由浅层向深层逐渐由扁平样至椭圆或圆形的细胞组成，这些软骨细胞维持关节软骨的正常代谢。关节软骨没有神经支配，也没有血管，其营养成分必须从关节液中取得，而其代谢废物也必须排至关节液中，关节软骨的这种营养代谢必须通过关节运动，使关节软骨不断的受到压力刺激才行，所以关节运动对于维持关节软骨的正常结构起重要的作用。关节软骨细胞位于关节软骨陷窝内。幼稚的关节软骨细胞位于关节软骨组织的表层，单个分布、体积较小、呈椭圆形，长轴与关节软骨表面平行，越向深层的关节软骨细胞体积之间增大呈圆形，细胞核圆形或卵圆形、染色浅，细胞质弱嗜碱性，常见数量不一的脂滴。成熟的关节软骨细胞多2-8个成群分布于关节软骨陷窝内，这些关节软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成，称为同源细胞群。电镜下，关节软骨细胞有突起和皱褶，细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中，关节软骨细胞收缩为不规则形，在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的关节软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介：
公司实验室分离的兔关节软骨采用胶原酶联合中性dan白酶消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的兔关节软骨经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1) 将5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 从胸部解剖乳鼠，取出双肺置于预冷的PBS中，尽可能的除去结缔组织等，
3) 取肺边缘部分，剪碎，将组织块移入T25培养瓶中，倒置于细胞培养箱中，
4) 2h后，培养瓶中注入2 mL内皮培养基，小心将培养瓶正置于培养箱，确保组织块不会飘起来，
5) 每3d换液2mL，待细胞从组织块中爬出来后，隔2d换液，待细胞融合达到60-70%左右时，去除组织块，将肺微血管内皮细胞重新铺瓶。
大鼠小胶质细胞HAPI（种属鉴定） | 鸡肝癌细胞LMH（种属鉴定） |
人卵巢颗粒细胞KGN(STR鉴定正确) | 熊峡谷病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 |
大鼠乳腺癌细胞MADB106（种属鉴定） | 唾液弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人皮肤基底细胞癌TE354.T(STR鉴定正确) | 胎儿弯曲杆菌性病亚种探针法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠肺癌细胞带荧光 LLC+LUC | 空肠弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人恶性黑色瘤细胞A375 (STR鉴定正确) | 大肠弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人脑胶质瘤细胞Hs 683(STR鉴定正确 | 弯曲杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
小鼠细胞 | 鸭乙型肝炎病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人胚肾细胞2V6.11(STR鉴定正确) | 毛癣菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
SV40T转化人脐静脉内皮细胞PUMC-HUVEC-T1(STR鉴定正确) | 须毛癣菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人肺癌细胞NCI-H838(STR鉴定正确) | 红色毛癣菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
食管鳞状细胞癌 KYSE-180(STR鉴定正确) | 絮状表皮癣菌探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人外周血淋巴细胞8E5(STR鉴定正确) | 原代兔软骨细胞旋毛虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 |
人肾透明细胞腺癌细胞786-O(STR鉴定正确) | 布氏旋毛虫探针法荧光定量PCR试剂盒 |
异嗜性白血病病毒（X-MuLV）核酸检测（荧光PCR法） | 米氏旋毛虫探针法荧光定量PCR试剂盒 |
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出T-25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置4-6小时或过夜，以稳定细胞状态，然后换用新鲜培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.125%消化液约2ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm/min，离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.125%消化液约2ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落，再加入培养液终止消化，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm/min，离心5min；
3）用适当量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=7:2:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中，滴加入培养液5ml混匀细胞，然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中；
3）放置于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜培养基继续培养。
