生物菌种检测原理2017/10/18

生物菌种检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人总蛋白（TP）捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的人总蛋白（TP）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心

生物菌种标本的收集和保存2017/10/18

生物菌种标本的收集和保存用于ELISA试剂盒测定的临床标本zui为常用的是血清（浆），也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式释放，因此，在ELISA试剂盒测定此类激素时，有必要在密切相

海洋微生物菌种说明书检测原理2017/10/16

海洋微生物菌种检测原理：本试剂盒采用酶谱法(Zymography)检测MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一种广为使用的、基于SDS-PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法，其灵敏度可达1nM，高于ELISA方法，其基本原理和程序是：制备加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶，含蛋白酶的样品在此凝胶中进行电泳，电泳结束后取出凝胶与酶反应Buffer孵育，凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶条带的位置，蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白，因而不被染色而

林业菌种测定原理2017/10/13

林业菌种测定原理采用竞争机制原理，标准或样品中的Gas.和加入的125I-Gas.共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I-Gas.与抗体的结合量与标准或样品中Gas.的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分（B）与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，并计算相应结合率B/B0。用已知标准Gas.含量与对应结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中Gas.的含量。样本要求取静脉血分离血清，待测；血浆则需加入抗凝剂，混匀，分离血浆后，待

生物菌种详细操作步骤2017/10/11

生物菌种详细操作步骤：1．取出试剂盒室温平衡30min，取出血样放至室温；2．配标准品：取150uL标准品加入150uL标准品稀释液稀释，依次稀释5次；3．加样：分别于各反应孔中加入标准品50uL，样品40UL，标准品做复孔，样品做3孔；4．分别于样品孔中加入10UL抗体；5．标准品和样品孔中分别加入50uL链酶亲和素-HRP，盖上封板膜,轻轻震荡混匀，37℃温育60min；6．配洗涤液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用；7．洗涤：小心揭开封板膜，弃去液体，甩干，每孔加200uL洗涤液

林业菌种操作程序总结2017/10/09

林业菌种操作程序总结1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。400pg/ml5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液200pg/ml4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液100pg/ml3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液50pg/ml2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液25pg/ml1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对

生物菌种实验操作方法2017/10/06

生物菌种实验操作方法实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本zui常用、zui基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响，但可进行抗原修复，是免疫组化中的组织标本制作方法。进口elisa试剂盒实验所用的抗体免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体，单克隆抗体是一个B淋巴细胞克

生物菌种操作程序总结2017/09/29

生物菌种操作程序总结1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80pmol/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40pmol/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20pmol/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10pmol/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5pmol/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白

生物菌种样本处理2017/09/27

生物菌种样本处理：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)去除颗粒。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀

林业菌种实验操作2017/09/25

林业菌种实验操作1.取出试剂盒，于室温（20-25℃）放置15-30分钟。实验过程应在室温（20-25℃）进行。2.取出酶标板，按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。3.空白微孔中加入50μl的样品，空白对照加入100μl的蒸馏水。4.在各孔中加入100μl的酶标记溶液（不含空白对照孔）。5.将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应1小时（在孵育箱中保持稳定的温度与湿度）。6.充分清洗酶标板5次，保持各孔有充足的水压（浓缩洗涤液以1：100的比例与蒸馏水稀释7.酶标板洗涤后用吸

生物菌种测定原理2017/09/22

生物菌种测定原理采用竞争机制原理，标准或样品中的Gas.和加入的125I-Gas.共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125I-Gas.与抗体的结合量与标准或样品中Gas.的含量呈一定的函数关系。用免疫分离剂（PR）将结合部分（B）与游离部分（F）分离后，测定结合部分的放射性强度，并计算相应结合率B/B0。用已知标准Gas.含量与对应结合率作图，即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中Gas.的含量。样本要求取静脉血分离血清，待测；血浆则需加入抗凝剂，混匀，分离血浆后，待

海洋微生物菌种检测原理2017/09/18

海洋微生物菌种检测原理本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预先包被人血管生成素样蛋白3（ANGPTL3）多克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B，底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人血管生成素样蛋白3（ANGPTL3）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计

生物菌种组成结构2017/09/13

生物菌种组成结构1、血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。2、血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。5、保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离

海洋微生物菌种骤进行操作2017/09/06

海洋微生物菌种骤进行操作：可以使用适当的裂解液裂解贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品。对于某些特定的亚细胞组份蛋白，例如细胞核蛋白、细胞浆蛋白、线粒体蛋白等，可以参考相关文献提取这些亚细胞组份蛋白，也可以使用试剂盒进行抽提。收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大。（1）、SDS-PAGE凝胶配制SDS-PAGE凝胶可以参考一些文献资料进

生物菌种样本收集2017/09/04

生物菌种样本收集1．外周血一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。如该部位不符合要求，以其他手指部位代替。对烧伤病人，可选择皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测（如白细胞计数、分类等）受生理因素影响波动过大，比较时宜使条件尽量一致。涉及到体内出、凝血功能的检测项目（如血小板计数，出血时间或凝血时间等）的检测，一定要注意了解患者是否用过抗凝、促凝药物，以便在减少或避免干扰因素的影响。2．静脉血除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外，目前绝大多数检测项目的分析检测

生物菌种基本原理2017/08/28

生物菌种基本原理1）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；2）抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。样本处理方法1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右(2000-3000转/

林业菌种操作的通用的规矩2017/08/23

林业菌种操作的通用的规矩1.在运用微量加样器时，罗致不一样瓶子中液体后要更换枪头，即使罗致标准品溶液。2.罗致液体时速度不易太快，避免产生气泡，罗致的量不可准确。3.要保证微量加样器的准确性，可以运用蒸馏水和电子天平进行判定(由于蒸馏水不含杂质，温度环境为20％支配时，lmL的水可以看作是lg、200L的水可以看作是0．2g)每一把微量加样器都应当将其zui高量程和zui低量程进行判定。4.将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孑L壁接触，液滴会天然流下去。吸入液体时的

林业菌种测定步骤2017/08/16

林业菌种测定步骤使用前将所有IL-6ELISA试剂盒和样本平衡至室温。推荐所有的样本、标准和对照测定双份。1.准备所有的试剂和工作标准品。2.取下多余的微量培养板条，放回装有干燥剂的锡箔袋中，重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul标准品、样本和对照。用橡皮条密封。室温孵化2小时。记录测定标准和样本的分布。5.吸弃孔内液体，每孔400ul洗涤液，充分洗涤后*去除液体。在干净的纸上拍干。反复洗涤4次。6.每孔加入200ulIL-6Conjugat

生物菌种操作注意事项2017/08/14

生物菌种操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露

海洋微生物菌种测定步骤2017/08/11

海洋微生物菌种测定步骤使用前将所有IL-6ELISA试剂盒和样本平衡至室温。推荐所有的样本、标准和对照测定双份。1.准备所有的试剂和工作标准品。2.取下多余的微量培养板条，放回装有干燥剂的锡箔袋中，重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul标准品、样本和对照。用橡皮条密封。室温孵化2小时。记录测定标准和样本的分布。5.吸弃孔内液体，每孔400ul洗涤液，充分洗涤后*去除液体。在干净的纸上拍干。反复洗涤4次。6.每孔加入200ulIL-6Conju