《海水中喹诺酮类抗生素的测定 HPLC-MSIMS》征求意见

　　【仪表网 仪表标准】根据《青岛微藻产业学会团体标准管理办法》，由青岛微藻产业学会批准立项，中国水产科学研究院黄海水产研究所牵头起草的《海水中喹诺酮类抗生素的测定 高效液相色谱-串联质谱法》团体标准已完成征求意见稿，现公开征求意见，诚挚邀请各相关单位和个人对上述标准提出宝贵的意见和建议。
 

　　目前，我国对水产品中喹诺酮类抗生素的残留已经展开了充分的调查研究，针对海洋环境中喹诺酮类抗生素的检测也得到了越来越多的重视。已经报道的检测方法中存在许多问题，比如待测的喹诺酮类抗生素种类不全、回收率不理想、灵敏度低等，而且现在针对此类抗生素在环境中的检出尚无完整的一套检测标准。因此，迫切需要建立海水中喹诺酮类抗生素的高灵敏度、准确、快速、简便的检测标准。
 

　　为了对环境中抗生素进行有效监控，由中国水产科学研究院黄海水产研究所牵头，联合青岛浩澳环保科技有限公司、天祥(天津)质量技术服务有限公司青岛分公司联合起草标准，并申请作为青岛微藻产业学会团体标准进行发布。本标准于2022年7月6日被青岛微藻产业学会批准立项，团体标准立项号为T/QMIS 2022-03，团标名称暂定为《海水中喹诺酮类抗生素的测定 高效液相色谱-串联质谱法》。
 

　　本标准按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。参考GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法；GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法；GB 17378.2 海洋监测规范第2部分：数据处理与分析质量控制；GB 17378.3 海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输等规程编制。
 

　　本方法规定了液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定海水中17种喹诺酮类药物残留量的样品采集、处理、分析步骤、结果计算、质量保证和质量控制的方法和程序。
 

　　本方法适用于海水、河口水及入海排污口污水样品中依诺沙星、麻保沙星、氧氟沙星、培氟沙星、氟罗沙星、洛美沙星、诺氟沙星、环丙沙星、奥比沙星、恩诺沙星、丹诺沙星、沙拉沙星、司帕沙星、双氟沙星、噁喹酸、氟甲喹、萘啶酸单种或多种药物残留量的测定。
 

　　海水中喹诺酮类药物的检出限为5.0 ng/L，检测定量限为20.0 ng/L。
 

　　方法原理：
 

　　海水样品中的喹诺酮类药物经固相萃取柱富集、净化，用液相色谱-串联质谱仪测定，内标法定量分析。
 

　　仪器和设备：
 

　　1.液相色谱-串联四极杆质谱仪(LC-MS/MS)：配电喷雾离子源(ESI)。2.天平：感量 0.01g。3.分析天平：感量0.00001g。4.涡旋混合器。5.氮吹仪。6.pH 计。7.固相萃取装置。8.固相萃取柱：500mg/6mL，Oasis HLB 柱或性能相当者。9.醋酸纤维滤膜：0.45µm。10.水相和有机相滤膜：0.22µm。11.尖底玻璃离心管：具刻度，10mL。12.棕色容量瓶：10 mL 、100mL和 500mL。
 

　　提取和净化：
 

　　固相萃取柱(5.9)置固相萃取装置(5.7)上，依次用6 mL甲醇和6 mL乙酸铵溶液(4.8)进行平衡活化，备用。
 

　　准确量取500 mL经0.45 µm醋酸纤维膜过滤后的海水样品，加入适量盐酸溶液(4.7)调节pH至3，准确加入1 µg/mL混合内标标准工作溶液50µL(4.16)，摇匀，以约5 mL/min的流速通过活化后的固相萃取柱。然后用10 mL乙酸铵溶液(4.8)淋洗，用氮气吹至近干，用6mL甲醇(4.2)洗脱，收集洗脱液于10 mL尖底玻璃离心管(5.11)中，尖底玻璃离心管置于氮吹仪(5.5)内，40℃水浴下用氮气吹至近干，残留物用0.1%甲酸水-乙腈(4.10)稀释至1mL，用涡旋混合器(5.4)涡旋混匀1 min，经0.22 µm水相和有机相滤膜(5.10)过滤至进样瓶中，待测。
 

　　标准曲线绘制：
 

　　准确吸取混合标准工作溶液(4.15)适量，用 0.1%甲酸水-乙腈(4.10)逐级稀释，配 制成浓度为 1、2、5、10、20、50、100 和 200 ng/mL 的标准系列溶液，同时加入混合内标标准工作溶液(4.16)，使内标浓度均为 50 ng/mL。以被测组分与其对应内标的峰面积比值为纵坐标，以系列标准溶液中各个组分含量与对应内标含量比值为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数。
 

　　精密度和准确度：
 

　　6家实验室对10.0 ng/mL、50.0 ng/mL和100.0 ng/mL三个加标水平的海水样品分别进行了5次重复测定：在10.0ng/m添加水平下，六家实验室相对标准偏差为3.67%～5.41%；实验室间再现性相对标准偏差为4.28%；在20.0ng/m添加水平下，六家实验室相对标准偏差为3.67%～5.41%；实验室间再现性相对标准偏差为4.28%；在50.0ng/m添加水平下，六家实验室相对标准偏差为3.67%～5.41%；实验室间再现性相对标准偏差为4.28%。