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细胞是生物体形态结构和生命活动的基本单位。通常认为细胞是人体的最小单位,它是由许多更小的具有自身功能的结构组成。尽管人类细胞大小不等,但所有的细胞均很小。即使是最大的细胞如受精卵,也是肉眼所不能见到的。
细胞状态不好可能原因:
一、细胞本身的状态
1. 细胞传代次数多,细胞老化;
2. 细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;
3. 细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;
4. 1酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未全分离而成团,细胞死亡;
5. 细胞的冻存与复苏:慢冻速溶。
二、污染
1. 支原体污染;
2. 霉菌污染;
3.血清中有黑胶虫。
三、培养基或血清
1. 更换血清或培养基之前未进行验证;
2. 选择的培养基是否合适;
3. 培养基配制是否合适;
4. 培养基配制是否准确无误。
四、培养环境
1. CO2供应是否正常;
2. 培养箱或摇床温度控制是否正确。
针对性上面原因的解决方案:
1.注意细胞的本身状态:如传代次数,接种量等;
2.避免产生污染(用正规,合法,可朔源的血清);
3.更换好一点的血清;
4.要用合适的血清或培养基,最好经过验证;
5.用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。注意好实验环境要,保持细胞间整个环境的洁净度。
6.换用进口的一次性塑料培养瓶。
7.建议清理无菌室所有物品,重新灭菌,用KMnO4熏蒸,按使用无菌室做,细胞重新复苏。
8.在换液前先加入生理盐水并轻轻拍打,冲洗干净后再加入培养液,坚持天天洗,传代时加生理盐水再离心一次,接种密度稍大一些,一段时间后,虫子就会大大减少,对细胞的生长也不会有大的影响。
9.注意实验室的环境。
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