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鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒操作说明

时间:2019/12/6阅读:275
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                      鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒操作说明

 

   十二月的家乡,雪,开始洋洋洒洒地飘舞。地上的麦子同老人和孙子的目光一起疯长。回归的候鸟,捎来了老人的、孙子的父亲回归的消息。家乡桃树的芽孢,开始萌动。接下来介绍鲍疱疹样病毒PCR检测试剂盒操作说明。

以下原则:

 

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

 

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

 

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

 

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

 

⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

 

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

 

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

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