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其它elisa试剂盒实验原理

时间:2020/10/21阅读:372
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其它elisa试剂盒实验原理:

将目标抗体包被于微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的目标连接于固相载体上的抗体结合,然后加入微生物化的目标抗体,将未结合的生物素抗体洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

其它elisa试剂盒性能:

1. 灵敏度:小的检测浓度小于1号标准品。其它elisa试剂盒稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性:不与其它细胞因子反应。

3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

其它elisa试剂盒安全性:

1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。

2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

4. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。

5. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。

6. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同其它elisa试剂盒批号的试剂不要混用。保质前使用。

7. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。

8. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

9. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

10. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。

11. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。

12. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

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