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小鼠骨髓多能干细胞培养操作2023/10/23
小鼠骨髓多能干细胞培养操作：培养操作：一、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基...
多胺氧化酶(PAO)测试盒比色法活性计算2023/10/17
测定原理：PAO催化多胺氧化产生过氧化氢，在过氧化物酶存在的条件下与底物显色，在550nm下有特征吸收峰，通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性。PAO活性计算：1、按样本蛋白浓度计算：单位定义：每m...
培养基​间歇灭菌与连续灭菌比较2023/10/8
培养基间歇灭菌与连续灭菌比较:1、歇灭菌的优点和缺点优点是设备要求低，不需另外设置加热、冷却装置；操作要求低，适于手动操作，适合于小批量生产规模；适合于含有大量固体物质的培养基的灭菌。缺点是培养基的营...
原代细胞与传代细胞培养不同点分析2023/10/5
区别一：定义不同原代细胞培养：原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首培养，也叫初代培养。传代细胞培养：传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。对单...
扩增曲线的四个时期解释2023/9/25
扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
PCR反应结果无扩增条带分析2023/9/18
PCR反应结果无扩增条带分析:1、酶失活或在反应体系中未加入酶。TaqDNA聚合酶因保存或运输不当而失活，往往通过更换新酶或用另一来源的酶以获得满意的结果。2、模板含有杂质。特别是对甲醛固定及石蜡包埋...
细胞冻存及复苏操作步骤2023/9/11
细胞冻存及复苏操作步骤：一、冻存1、消化细胞，将细胞悬液收集至离心管中。2、1000rpm离心10分钟，弃上清液。3、沉淀加含保护液的培养，计数，调整至5×106/ml左右。4、将悬液分至冻存管中，每...
PCR反应循环参数注释2023/9/8
循环参数:1.预变性模板DNAwan全变性与PCR酶的wan全激活对PCR能否成功至关重要，建议加热时间参考试剂说明书，一般未修饰的Taq酶激活时间为两分钟。2.变性步骤循环中一般95℃，30秒足以使...
单克隆抗体的性质鉴定方法2023/8/28
当获得多个杂交瘤细胞株时，要了解哪一株是zui适用的，则一定要通过各种鉴定。分析常见的方法有：（一）Ig类型测定通常以免抗小鼠Ig类及亚类抗体与培养液中单克隆抗体按双向琼脂扩散法进行测定，确定其Ig类...
胎牛血清质控外观判定要素2023/8/21
拿到血清，zui先接触的是血清外观，对于缺少细胞培养经验的人来说，外观的判断尤为重要。1、颜色根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上...
大鼠子宫内膜基质细胞操作要点2023/8/17
大鼠子宫内膜基质细胞操作要点：1、将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。2、将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37...
荧光定量PCR扩增曲线四个时期2023/8/7
扩增曲线是描述PCR动态进程的曲线，以循环数为横坐标，以反应过程中实时荧光信号强度为纵坐标。理论上PCR过程中反应产物是以指数增长的，但随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶失活、dNTP和引物枯竭、反...
抗原几个基本条件2023/8/1
构成抗原的基本性质，一般须具备如下几个基本条件：异源物质、有一定的分子量、有较复杂的分子结构、特异性。1、异源物质：在正常情况下，只有异体物质进入体内才可能具有免疫原性。一般说，这种异体物质必须是动物...
ELISA样品处理和移液技术注意事项2023/7/17
试剂和样品处理不当或储存不正确会影响下游分析，因为不同的缓冲剂和试剂会有不同的储存要求。例如，有些必须储存在冰箱里，有些在室温下，有些用感光罩（如铝箔）。如果有计划在未来的实验中使用相同的样品，那么应...
探究酶的特性实验材料及选择鉴定的试剂2023/7/10
酶的特性包括酶的高效性、酶的专一性、作用条件较温和（温度和PH对酶的活性有影响）。常见的实验材料及选择鉴定的试剂：1、H2O2：过氧化氢在FeCl3和过氧化氢酶的催化及高温条件下分解，可通过观察气泡的...
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