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货号 | FS-01S63462 |
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规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
货号:FS-01S63462
商品介绍:
测定意义 SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。 测定原理 SDH催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在600nm处具有特征吸收峰,通过600nm吸光度的变化,测定2.6-DPIP的还原速度,代表SDH酶活性。 需自备的仪器和用品 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
神经生长因子诱导蛋白B(NGFIB)检测试剂盒枯草芽孢杆Sheep L-LDH (L-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit
生长因子受体结合蛋白2(Grb2)检测试剂盒矩圆黑盘孢Sheep FBG (Fibrinogen) ELISA Kit
毛状样蛋白1(COTL1)检测试剂盒金灰青霉Sheep C1q (Complement 1q) ELISA Kit
腓骨蛋白7(FBLN7)检测试剂盒浅青紫链霉Sheep IL-1R2 (Interleukin 1 Receptor Type II) ELISA Kit
溶质载体家族1成员5(SLC1A5)检测试剂盒梨形卷枝霉Sheep F-Box Protein 2(FBXO2) ELISA Kit
P物质(SP)检测试剂盒杨树菇5号Sheep NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) ELISA Kit
猬因子相互作用蛋白(HHIP)检测试剂盒酿酒酵母Sheep NNE (Non-Neuronal Enolase) ELISA Kit
微纤丝关联蛋白4(MFAP4)检测试剂盒白假丝酵母Sheep IgG3 (Immunoglobulin G3) ELISA Kit
左右决定因子1(LEFTY1)检测试剂盒谷棒杆Sheep NTRK3 (Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3 ) ELISA Kit
转胶蛋白(TAGLN)检测试剂盒树舌灵芝Sheep WARS (Tryptophanyl tRNA Synthetase) ELISA Kit
过氧化氢(CAT)检测试剂盒简青霉Sheep AFGF/FGF1 (Acidic Fibroblast Growth Factor 1) ELISA Kit
色P450氧化还原(CPR)检测试剂盒大肠杆Sheep MUC17 (Mucin 17) ELISA Kit
弗林蛋白(FUR)检测试剂盒猴头Sheep ANG2 (Angiopoietin 2) ELISA Kit
微精蛋白β(MSMβ)检测试剂盒东方伊萨酵母Sheep COL13 (Collagen Type XIII) ELISA Kit
铜转运蛋白1(COPT1)检测试剂盒孟氏假单胞Sheep Cyt-C (Cytochrome C) ELISA Kit
SDH琥珀酸脱氢酶检测试剂盒可见分光光度法喜树 分析标准品,≥98%氯亚铂 ARAnti-LAIR-1/CD305 白相关球蛋白样受体1抗体
喜树 97%醋钯 AR,Pd 46.0 - 48.0 %Anti-Layilin 透明质受体抗体
二乙酯 98%氧化钯 Pd ≥85% Anti-LAIR-2/CD306 白相关球蛋白样受体2抗体
多烯紫杉 98%无水氧化铂 铂含量≥85.4% Anti-LC3A/B 自噬微管相关蛋白轻链3抗体
7-乙基-10-羟基喜树 98%硝铂溶液 Pt, 15%Anti-LCAT 卵磷胆酰基转移抗体
10-羟基喜树 分析标准品,98%氯化钯 Pd 59-60%Anti-LATS1 肿瘤抑制基因LATS1抗体
紫杉 分析标准品,≥98% 硝钯(II) 水合物 Pd ≥39.0%Anti-Phospho-LATS1 (Thr1079) 磷化肿瘤抑制基因LATS1抗体
紫杉 98%钯粉 99.9% metals basis,粒径0.5μmAnti-Phospho-LATS1 (Ser909) 磷化肿瘤抑制基因LATS1抗体
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