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αKGDHα酮戊二酸脱氢酶紫外分光光度法

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-11 14:43:03浏览次数:141次

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货号 FS-01S63458
αKGDHα酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法公司正在出售的产品:基质金属蛋白-8/胶原2抗体10倍蔗糖核电泳上样缓冲液
人肺癌细胞;L10226倍蔗糖DNA电泳上样缓冲液
人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS16倍聚蔗糖DNA电泳上样缓冲液
威尼克何德霉6倍丙三DNA电泳上样缓冲液

公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒,质量信得过产品,售后完善。服务于高校及免疫学科研单位,竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。

产品名称:αKGDHα酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法

规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

货号:FS-01S63458
商品介绍:

测定意义

α-KGDH(EC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶之一,催化α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶。

测定原理

α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶生成琥珀酰辅酶、 二氧化碳和 NADH,NADH在340 nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。

需自备的仪器和用品

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153604.png

粗酶液提取:

1、细胞或组织样品的制备:

培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

生长因子受体结合蛋白10(Grb10)联免疫试剂盒匍枝根霉原变种PD-L1 (E1L3N®) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

生长因子受体结合蛋白14(Grb14)联免疫试剂盒白僵mTOR (7C10) Rabbit mAb (PE Conjugate)

生长因子受体结合蛋白2(Grb2)联免疫试剂盒香菇—五香1号DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 488 Conjugate)

生长因子受体结合蛋白7(Grb7)联免疫试剂盒酿酒酵母DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Alexa Fluor® 647 Conjugate)

食欲B/阿立新B(OXB)联免疫试剂盒猴假单胞DYKDDDDK Tag (D6W5B) Rabbit mAb (Binds to same epitope as Sigma's Anti-FLAG® M2 Antibody) (Pacific Blue™ Conjugate)

视黄诱导基因/RIG-1样受体(RLR)联免疫试剂盒 奇异球Atg2A Antibody

视网膜母瘤蛋白1(RB1)联免疫试剂盒 盘孢Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb

视网膜母瘤抑制蛋白(PRB)联免疫试剂盒 酿酒酵母Phospho-Tau (Ser416) (D7U2P) Rabbit mAb

嗜环蛋白/亲环A(CYPA)联免疫试剂盒 锗栓孔Rad54 (D4W3Z) Rabbit mAb

嗜环蛋白/亲环B(CYPB)联免疫试剂盒  芽胞杆Animal-Free Blocking Solution (5X)

嗜环蛋白/亲环D(CYPD)联免疫试剂盒  中国台湾根霉Animal-Free Blocking Solution (5X)

神经纤维网蛋白2(NRP2)联免疫试剂盒苹果落叶交链孢霉DAPT

柠檬合(CS)联免疫试剂盒假单胞属Actinomycin D

8-羟基鸟糖苷1(OGG1)联免疫试剂盒 硬结节杆Carfilzomib

嗜粒趋化因子受体(ECFR)联免疫试剂盒 根瘤His-Tag (D3I1O) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
αKGDHα酮戊二酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法自噬相关蛋白18抗体Human MARVELD3 ELISA Kit人补体7(C7)ELISA试剂盒,

自噬相关蛋白4A抗体Human MAS1L ELISA Kit小鼠氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)ELISA试剂盒,

载脂蛋白A4抗体Human MAST1 ELISA Kit兔子γ干扰(IFN-γ)ELISA试剂盒,

12脂氧合抗体Human MAST3 ELISA Kit间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA试剂盒--动物,人

血管紧张III抗体Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit多肽YY(Peptide-YY)ELISA试剂盒--动物,人

腺苷环化3抗体Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒--动物,人

血管动蛋白抗体Human Caspase 12 ELISA Kit艾柯病IgM(ECHO IgM)ELISA试剂盒--动物,人

腺病早期E1A蛋白抗体Human CD320 ELISA Kit糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒--动物,人

 


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