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货号 | FS-01S63527 |
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产品名称:HL肝脂酶检测试剂盒微量法
规格:100管/48样
检测方法:微量法
货号:FS-01S63527
商品介绍:
测定意义 肝酯酶是脂肪分解酶,在肝实质细胞中合成,存在于肝脏窦周间隙内皮细胞表面和窦周间隙腔面的肝细胞微绒毛表面,可促进脂蛋白中的向类固醇激素转化,血浆中的HL活性增高时,血浆中小颗粒可导致LDL水平升高,加速动脉粥样硬化的发生。 测定原理 肝酯酶水解α-乙酸萘酯产生α-萘酚,可与固蓝B盐形成紫红色偶氮化合物,在595nm有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与肝酯酶活性成正相关。 自备实验用品及仪器 天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、微量石英比色皿。 |
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取:
1、细胞或组织样品的制备: 培养细胞:先收集细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),超声波破碎细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、血清(浆)样品:直接检测。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
巨肌激(MCK)检测试剂盒螺旋链霉Rabbit CENPB (Centromere Protein B) ELISA Kit
转录激活因子4(ATF4)检测试剂盒艾丁湖盐渍芽孢杆Rabbit SAA (Serum Amyloid A) ELISA Kit
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超氧化物歧化1(SOD1)检测试剂盒平菇Rabbit GLβ (Galactosidase Beta) ELISA Kit
髓过氧化物(MPO)检测试剂盒鸭疫里氏杆Rabbit bTC (Betacellulin) ELISA Kit
D-二聚体(D2D)检测试剂盒仙台链霉Rabbit DT (Dopachrome Tautomerase) ELISA Kit
雌受体α(ERα)检测试剂盒枯草芽孢杆Rabbit FLRT2 (Fibronectin Leucine Rich Transmembrane Protein 2) ELISA Kit
TBP结合转录向下调节因子1(DR1)检测试剂盒弗雷德里克斯堡假单胞Rabbit GSTα5 (Glutathione S Transferase Alpha 5) ELISA Kit
脯酰羧肽(PRCP)检测试剂盒拟盘多毛孢Rabbit NAP (Neutrophil Alkaline Phosphatase) ELISA Kit
中性粒明胶关联脂质运载蛋白(NGAL)检测试剂盒酿酒酵母Rabbit MCP-2/CCL8 (Monocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit
组蛋白H2B(H2B)检测试剂盒黑曲霉Rabbit c-fos ELISA Kit
B9(VB9)检测试剂盒青岛芽孢杆Rabbit LMP7/PSMB9 (Low Molecular-weight Protein/proteasome Beta-type Subunit) ELISA Kit
骨粘连蛋白(ON)检测试剂盒枯草芽孢杆Rabbit AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit
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骨粘连蛋白(ON)检测试剂盒红斑黄菇Rabbit CFH (Complement Factor H) ELISA Kit
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丝羧肽1抗体Anti-GC Antibody石油栖热腔说明书
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磷化蛋白酪磷2抗体Anti-GCK Antibody青色链霉品牌
SYF2蛋白抗体Anti-GCLC Antibody白环柄菇说明书
胆酰基转移2抗体Anti-GDF8/Myostatin/MSTN Antibody蝉花虫草品牌
Saitohin蛋白抗体Anti-GDA Antibody云芝栓孔(云芝)品牌
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