13524666654
当前位置：上海抚生实业有限公司>>生化检测试剂盒>>三羧酸循环系列>> ICDHm线粒体异柠檬酸脱氢酶紫外分光光度法
| 货号 | FS-01S63466 |
|---|
公司产品仅用于科研提供的生化试剂盒，质量信得过产品，售后完善。服务于高校及免疫学科研单位，竭诚为您提供更周到的服务更优质的产品。
产品名称：ICDHm线粒体异柠檬酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法
规格：50管/48样
检测方法：紫外分光光度法
货号：FS-01S63466
商品介绍：
测定意义 ICDHm（EC 1.1.1.41）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，在三羧酸循中催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸，同时将NAD+ 还原为NADH，是三羧酸循环的限速酶之一，其催化的反应是细胞NADH主要来源之一。 测定原理 ICDHm催化NAD+ 还原生成NADH，导致340nm处光吸收上升。 需自备的仪器和用品 紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
溶菌组织因子途径抑制物Lysozyme
EB病核抗原1小鼠可溶性血管内皮蛋白C受体Epstein-Barr viral nuclear antigen 1
EB病核抗原2大鼠性磷Epstein-Barr viral nuclear antigen 2
EB病衣壳抗原干扰诱导蛋白10Epstein-Barr Virus Capsid Antigen
三磷腺柠檬裂解小鼠嗜粒趋化因子ATP citrate lyase
酰基A氧化大鼠血管性血友病因子裂解蛋白Acyl-CoA Oxidase
3-羟酰A脱氢白介13-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase
脯脱氢大鼠血管生成4proline dehydrogenase
含EGF样模块粘蛋白样受体1小鼠嗜粒趋化蛋白EGF-like module-containing mucin-like hormone receptor-like 1(
甲状腺白介17thyroxine
促甲状腺大鼠脂多糖结合蛋白Thyroid Stimulating Hormone
异丙肾上腺小鼠E选择Isoprenaline Hydrochloride
硫代反应物小鼠凋亡相关因子Thiobarbituric Acid Reactive Substances
神经纤维网蛋白2大鼠乙脱氢Neuropilins 2
磷化核转录因子p65白介1β (IL-1B)Nuclear factor-kappa B P65
ICDHm线粒体异柠檬酸脱氢酶检测试剂盒紫外分光光度法胰月示－亚硫盐－环丝琼脂基础 BR磷氢二铵 SPCath Ab(Human Cathepsin Antibodies) ELISA Kit 人组织蛋白抗体
尿琼脂培养基基础 BR磷氢二铵 99.99% metals basisLF/LTF Ab-Ig(Human Lactoferrin antibody IgG) ELISA kit 人乳铁传递蛋白/乳铁蛋白抗体IgG
WS琼脂 BR磷氢二铵 ACSBPI-Ab(Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody) ELISA Kit 人抗菌通透性增高蛋白抗体
2'-羟基乙酮 99%磷二氢 PTMPO-ANCA IgG(Human Mouse myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG) ELISA kit 人髓过氧化物特异性抗中性粒胞质抗体IgG
5-硝基吲唑 98%磷二氢 99.99% metals basisPR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit 人抗蛋白3抗体IgG
异辛烷 光谱纯磷二氢 SPAlpha-Fodrin IgG/IgA(Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit 人抗α-胞衬蛋白抗体IgG/IgA
虫草 分析标准品，99%（HPLC）磷二氢 AR，99.5%ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit 人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体
虫草 98%磷二氢 CP，99.0%Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit 人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体
请输入账号
请输入密码
请输验证码
以上信息由企业自行提供，信息内容的真实性、准确性和合法性由相关企业负责，仪表网对此不承担任何保证责任。
温馨提示：为规避购买风险，建议您在购买产品前务必确认供应商资质及产品质量。
仪表网