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| 货号 | FS-01S63471 |
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产品名称：MDHm线粒体苹果酸脱氢酶检测试剂盒微量法
规格：100管/96样
检测方法：微量法
货号：FS-01S63471
商品介绍：
测定意义 MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。 测定原理： MDHm催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。 需自备的仪器和用品： 紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 mL石英比色皿和蒸馏水。 |
操作步骤:
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。 6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。 7. 依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。在加终止液后立即进行检测。 |
粗酶液提取：
1、细胞或组织样品的制备： 培养细胞：先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），超声波破碎细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 2、血清（浆）样品：直接检测。 |
试剂的组成和配制：
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 200μL×1 支，4℃保存；
试剂三：液体 4mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：粉剂×2 瓶，4℃保存。
趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)联免疫试剂盒枯草芽孢杆MED26 (D4B1X) Rabbit mAb
上皮膜抗原(EMA)联免疫试剂盒 黑曲霉3.3928Phospho-NuMA (Thr2055) Antibody
上皮粘附分子(Ep-CAM/CD326)联免疫试剂盒 米根霉FoxO1 (D7C1H) Mouse mAb
双糖链蛋白聚糖(BGN)联免疫试剂盒马杜拉放线FoxO1 (D7C1H) Mouse mAb
神经调节蛋白1(NRG-1)联免疫试剂盒总状共头霉Spry2 (D3G1A) Rabbit mAb
神经激肽A(NKA)联免疫试剂盒酿酒酵母Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)
神经激肽B(NKB)联免疫试剂盒 多根硬皮马勃p95/NBS1 (D6J5I) Rabbit mAb
神经降压(NT)联免疫试剂盒 酿酒酵母HCN2 (D1C6I) Rabbit mAb
神经胶质成熟因子β(GMFB)联免疫试剂盒大叶胡枝子腐朽病Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb
神经胶质纤维性蛋白(GFAP)联免疫试剂盒铜绿假单胞(绿脓杆)CGRP (D5R8F) Rabbit mAb
心磷脂(CL)联免疫试剂盒大豆慢生根瘤CGRP (D5R8F) Rabbit mAb
己糖激1(HK1)联免疫试剂盒猪瘟病间接ELISA抗体检测试剂盒EphB4 (D1C7N) Rabbit mAb
神经丝蛋白(NF)联免疫试剂盒多粘类芽胞杆Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb
神经髓鞘蛋白(p2)联免疫试剂盒 嗜芽孢杆Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb
神经肽Y(NPY)联免疫试剂盒白色茶树菇PROX1 (D2J6J) Rabbit mAb
MDHm线粒体苹果酸脱氢酶检测试剂盒微量法亚铁,三水 ≥99.99% metals basis惕格 98%Anti-Phospho-beta-Arrestin 1(Ser412) /FITC 荧光标记磷化β抑制蛋白1抗体IgG
亚铁,三水 ACS, 98.5-102.0%惕格 Kosher, ≥98%, FG Anti- Beta-arrestin 2/FITC 荧光标记β-抑制蛋白2抗体IgG
亚铁,三水 AR，99.0%桃 98%Anti- Beta-Amyloid(1-16) /FITC 荧光标记β淀粉样肽（1-16）抗体IgG
氟钛 CP,99.0%γ-戊内酯 98%Beta-Amyloid(1-28)/FITC 荧光标记β淀粉样肽（1-28）抗体IgG
氟钛 AR,99.5%姜酮 98%Anti- Beta-Amyloid(1-40)/FITC 荧光标记β淀粉样肽（1-40）抗体IgG
氟硅 AR,99.0%姜酮 97%,香料级Beta-Amyloid 1-40(CT)/FITC 荧光标记β淀粉样肽（1-40）C端抗体IgG
氟硅 99.999% metals basis乙叔丁酯 99%Anti- Beta-Amyloid 1-40(CT)mouse/FITC 荧光标记β淀粉样肽 1-40 C端抗体IgG
氟 99.99% metals basis叔丁酯 98%Anti- Beta-Amyloid 1-42 CT(A Beta1-42)/FITC 荧光标记β淀粉样肽1-42 (C端抗体)IgG
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