EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-29说明书 返回列表页

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-29说明书
形态特性  淋巴母细胞样 　
生长特性  　悬浮生长
特征特性   该细胞系来源于一染色体畸变男性的外周血。2010年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。2010年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS　
传代方法   1:2传代；5-6天一次
传代情况  P2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　荧光法（-）
STR   -
同工酶

染色体 47， XXY

使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-29说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-29说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-29说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Rat Helicobacter pylori IgG (Hp-IgG) ELISA Kit 大鼠幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒

HumanHepatitisCvirusIgG,HCV-IgGELISAKit 人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanGranulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactor,GM-CSFELISA试剂盒人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织短链脂酰辅酶A合成酶(ACYLCOASYHETASE)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Humanmethoexate,MTXELISAKit人甲胺喋呤(MTX)ELISA试剂盒规格：96T/48T
大鼠血管内皮生长因子121(VEGF121)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGF121 ELISA Kit

Mouse aldosterone (ALD) ELISA Kit 小鼠固酮(ALD)ELISA试剂盒

Mousesolubleierleukin-1receptorⅡ,IL-1sRⅡELISAkit 小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanarabinogalactanproteins,AGPsELISAKit人阿拉伯半乳糖蛋白规格：48T/96T

细胞EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

ELISAKitCETP大鼠胆固醇酯转移蛋白规格：48T/96T
小鼠密封蛋白(OCLN)ELISA试剂盒 ，英文名： OCLN ELISA Kit

人可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA检测试剂盒HumansolublePhospholipaseA2,sPL-A2ELISAKit 96T/48T

大鼠胰岛素受体底物1(IRS-1)免疫试剂盒 Rat insulin receptor subsate-1,IRS-1 ELISA Kit

英文名称HumanIactPTHELISAKit全段甲状腺素(IactPTH)规格：96T/48T

风信子*培养基500毫升溶液/片剂

ELISAKitTNF-β人肿瘤坏死因子β规格：48T/96T
ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人细胞裂解液 (阳性对照)

kasumi-1, 人白血病细胞株

大鼠内脏脂肪细胞*培养基 100mL

Hepa1-6小鼠肝癌细胞 Mouse hepatoma cell line Hepa1-6 DMEM+10% FBS

IFNA2 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA2 / Ierferon alpha 2 蛋白 (Fc 标签)

MDA-MB-157(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 R 1610(中国仓鼠体细胞)
DT40   鸡淋巴瘤细胞   1ml/T75

MC3T3-E1   小鼠胚胎成骨细胞前体细胞   1ml/T75

3T3-L1   小鼠胚胎成纤维细胞   1ml/T75

NIH/3T3   小鼠胚胎细胞   1ml/T75
EB病毒转化的人B淋巴细胞；HH-29说明书小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT

大耳山羊肾细胞;LDG-2

ACLY Others Human 人 ACLY / acly / ATP ciate lyase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

SK-N-MC细胞，神经上皮瘤细胞 鼠骨髓瘤细胞,P3/NS1/1-Ag4-1细胞 人胃腺癌细胞;SGC-7901 [SGC7901]

人毛细胞RNAHHDPC miRNA5 μg

IL13RA2 Others Mouse 小鼠 IL13RA2 / CD213A2 人细胞裂解液 (阳性对照)
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