EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909说明书 返回列表页

细胞名称 EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909说明书
形态特性  淋巴母细胞样 　
生长特性  　悬浮生长
特征特性   该细胞系来源于一重度少精症男性患者的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS　
传代方法   1:2传代；5-6天一次
传代情况  P2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　荧光法（-）
STR   -
同工酶

染色体

使用权限 A类
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
山羊脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human pancreatic polypeptide (PP) ELISA Kit 人胰多肽(PP)ELISA试剂盒

HumanEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 人内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Humangrowth-associatedprotein43,GAP-43ELISA试剂盒人生长相关蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织多聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)活性荧光定量检测试剂盒20次

Humanmelanomaderivedleucinezipperexa-nuclearfactor,MLZEELISAKit人黑素瘤衍生亮氨酸拉链额外核因子(MLZE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
大鼠活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒 ，英文名： Activin-A ELISA Kit

Mouse a disiegrin and metalloproteinase 8 (ADAM8) ELISA Kit 小鼠解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)ELISA试剂盒

MouseCollagenaseTypeIIELISAKit 小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanPancreastatinELISAKit人胰抑制素规格：48T/96T

同位素法DNA斑点杂交试剂盒5次

大鼠淋巴细胞因子ELISAKit大鼠淋巴细胞因子ELISAKit，48T/96T大鼠淋巴细胞因子ELISAKit，48T/96T规格：48T/96T
小鼠卵白蛋白(OVA)ELISA试剂盒 ，英文名： OVA ELISA Kit

人免疫球蛋白轻链lambda(λ-IgLC)ELISA检测试剂盒Humanlambdaimmunoglobulinlightchain,λ-IgLCELISAKit 96T/48T

大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)免疫试剂盒 Rat ypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit

英文名称抗胰岛细胞抗体规格：96T/48T

辅助噬菌体R408培养试剂盒10次

ELISAKitNAP-2/CXCL7人中性粒细胞趋化蛋白2规格：48T/96T
20. 细胞系统

人神经胶质细胞瘤细胞;U251

CM-H128人角膜上皮细胞*培养基100mL

小鼠子细胞;U14 小鼠肝窦内皮细胞*培养基 100mL

NSC，大鼠神经干细胞 Rattus

F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人细胞裂解液 (阳性对照)
DLD-1   人结直肠腺癌上皮细胞   1ml/T75

HT-29   人结直肠腺癌细胞   1ml/T75

HCT-15   人结直肠腺癌细胞   1ml/T75

LoVo   人结直肠腺癌细胞   1ml/T75
EB病毒转化的人B淋巴细胞；KMY0909说明书小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP

仓鼠卵巢细胞;Lec1

AARS Others Mouse 小鼠 AARS / alanyl-NA syhetase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)

BEL-7405细胞，肝癌细胞 膀胱癌细胞,BI U-87细胞 615小鼠树突状细胞肉瘤瘤株;DCS

人肠微血管内皮细胞总RNAHIMEC NA

CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人细胞裂解液 (阳性对照)
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