当前位置:上海抚生实业有限公司>>核酸检测试剂盒>>荧光PCR法>> 48T 0.1PCR管转基因玉米品系MON87427核酸检测试剂盒
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 分类 | 货号 |
转基因玉米品系MON87427核酸检测试剂盒 | 荧光探针法 | FS-P10749 |
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
PCR技术的定量原理:
扩增曲线
在Real-time qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,最终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据最终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
链霉菌分类学及微生物药物学的研究模式菌株: no表面土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 12生长条件: 28℃
糙皮侧耳(平菇)生长条件: 25℃培养基: 0014提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no
易变链霉菌培养基: 0012模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 28℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
臭曲霉生长条件: 25-28℃培养基: 0015提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
铜绿假单胞菌生长条件: 37℃培养基: CM0051提供形式: 冻干物安全等级: 2模式菌株: no 真空冷冻干燥法
-1552℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
天山中慢生根瘤菌培养基: 0063模式菌株: no根瘤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1生长条件: 28-30℃ -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;矿物油法;定期移植法
ATCC53103培养基: 0006模式菌株: no种属: Lactobacillus│rhamnosus提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 37℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
伊平屋桥大洋芽孢杆菌大洋细菌模式菌株: no沉积物/多管沉积物(0-5cm)提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 471生长条件: 28℃
链霉菌属菌种抗真菌,抗金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌11、肠球菌模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0027生长条件: 28C
DSM41685=ATCC21273=JCM5064=KCCS-1064Type strain. Produces plant antiviral agent 84-B-3模式菌株: yes种属: Streptomyces│rameus提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 0038生长条件: 28℃
矢野口鞘氨醇菌生长条件: 30℃培养基: 2提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
-1553℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
植物乳杆菌培养基: 6模式菌株: no烂土豆提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 37℃ -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;其他
球菌分类学及嗜盐微生物其它方面的研究模式菌株: no盐矿沉积样品提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: 444生长条件: 28℃
肺炎克雷伯氏菌培养基: 53模式菌株: no污泥提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 30℃ -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
9-甲氧基喜树碱Hpt/HP(haptoglobin) 结合珠蛋白/触珠蛋白抗原Troponin T/c 心肌特异性肌钙蛋白T抗体
盐石蒜碱H-ras/Ras/Ras p21 peptide 原癌基因H-ras抗原Tropomyosin 原肌球蛋白1抗体
光甘草定HSTF2/HSF2 peptide 热休克转录因子2抗原TROP2/TACD2 表面糖蛋白Trop2抗体(胰腺癌标志物蛋白)
橙黄决明素BCRP/ABCG2(breast cancer resistance protein) 乳腺癌耐药相关蛋白(抗原)Trop-2 原肌球蛋白抗体
荷叶碱Hrasls3/HREV107(HRAS like suppressor 3) HRAS样抑制因子3抗原Trk C 酪氨激酶C抗体(神经生长因子受体的一种)
鹰嘴豆芽素AHSP47(Heat shock protein-47) 热休克蛋白-47抗原Trk B/NTRK2 酪氨激酶B抗体
10-羟基喜树碱HSP-90 Alpha(Heat Shock Protein 90 Alpha ) 热休克蛋白90α抗体Trk B/NTRK2 酪氨激酶B抗体
可可碱HSP-105 (heat sock protein-105) 热休克蛋白HSP105抗原TrK A/NTRK1 酪氨激酶A抗体
D-松HtrA2/Omi peptide 丝氨蛋白酶/线粒体丝氨蛋白酶多肽抗原Trk A/B/C 酪氨激酶A/B/C抗体
常春藤皂苷元IAA/BSA 吲哚-3-乙偶联牛血清白蛋白TRIP1/PSMC5 甲状腺受体相互作用蛋白1抗体
转基因玉米品系MON87427核酸检测试剂盒Atazanavirsulfate 阿扎那韦硫盐 质量规格:>98%,AR
Atazanavirsulfate 阿扎那韦硫盐(标准品) 质量规格:>98%,AR
ImipenemandCilastatinSodium 亚胺培南-西司他丁钠 质量规格:>98%,AR
Vinpocetine 长春西丁,长春西汀 质量规格:>98%,ATP竞争性的mTOR抑制剂
Phenytoinsodium 妥英钠 质量规格:>98%,BC
Oxcarbazepine 奥卡西平 质量规格:>98%,BC
Oxcarbazepine 奥卡西平(标准品) 质量规格:>98%,BC
Hypericin 金丝桃素(标准品) 质量规格:>98%,BC
D-(+)-Glucopyranose6-phosphate D-葡萄糖-6-磷 质量规格:>98%,BC
D-Gluconate6-phosphate3sodiumsalt 6-磷葡萄糖三钠盐 质量规格:>98%,BC
Azathioprine 硫唑嘌呤 质量规格:>98%,BC
BarnidipineHCl 盐巴尼地平 质量规格:>98%,BC
CefepimeHydrochloride 盐头孢吡肟 质量规格:>98%,BC
CefepimeHydrochloride 盐头孢吡肟(标准品) 质量规格:>98%,BC
Loxoprofensodium 洛索洛芬钠 质量规格:>98%,BC
PCR检测试剂盒:
(一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
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