大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6说明书 返回列表页

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细胞名称  大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6说明书
形态特性  上皮样 　
生长特性  　贴壁生长
特征特性   皮质醇可抑制该细胞的生长。该细胞表达肠上皮*抗原，在20代以前保持恒定的生长速度和细胞形态，此后生长速度迅速下降，细胞形态也发生改变。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS；0.01mg/ml Insulin　
传代方法   1:3~1:6传代；每周换液2次。
传代情况  P24
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测  　培养法（-）
STR   -
同工酶

染色体 40~51

使用权限 A类
大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6说明书操作流程：
1.1 主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于12个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ×100％，计算贴壁率。
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线
大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6说明书注意事项：
1. 接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管*吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。
大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6说明书美国菌种保藏中心， 又称美国模式菌种收集中心(ATCC)，是位于马里兰洲洛克菲勒的一家私营的，非赢利性组织。目前它可以提供各种动植物细胞、标准品、菌株达两万多种。ATCC成立于1925年，是世界上大的生物资源中心，由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理，是一家性、非盈利生物标准品资源中心。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品，推动科学研究的验证、应用及进步 ATCC可以提供以下类别生物标准品：细胞株（3000多种）；菌株（15000多种）；动植物病毒株（2500多种）以及重组物质等。
AC肉汤250g用于常见微生物增菌培养和不含防腐剂样品的无菌试验

沙氏琼脂培养基 250(g) incubation media 沙氏琼脂培养基 250(g)

假单胞F琼脂 Pseudomonas Agar F 250克 铜绿(绿脓)假单胞菌色素生成试验

YGC琼脂250用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分离培养(ISO方法)incubationmediaYGC琼脂250用于奶和奶制品中霉菌及酵母菌分离培养(ISO方法)

UreaseAgarBase
明胶  20支

1%NaCl阿拉伯糖  20支

精酸双水解酶肉汤  20支

1%NaCl甘露糖  20支
蛋白胨水(靛基质培养基)2200g供鉴别细菌能否产生靛基质的生化反应

12202 布氏菌疫苗培养基(液体) 1 万 ml/袋 用于布氏菌疫苗 incubation media 12202 布氏菌疫苗培养基(液体) 1 万 ml/袋 用于布氏菌疫苗

TetrathionateBrothBase

ColumbiaCANAgarBase

BSSA琼脂培养基 250g 用于果汁中嗜酸耐热菌的检测。
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株;G422

IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脐带单核细胞*培养基 100mL

7WCY1.0细胞，人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株 非01群霍乱弧菌 豹猫肺成纤维样细胞;LCL4

CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白

NR8383(大鼠肺泡巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人细胞裂解液 (阳性对照)
KM小鼠脑神经胶质母细胞瘤瘤株;G422

IL13 Others Mouse 小鼠 IL13 / ALRH 人细胞裂解液 (阳性对照)

人脐带单核细胞*培养基 100mL

7WCY1.0细胞，人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株 非01群霍乱弧菌 豹猫肺成纤维样细胞;LCL4

CCL1 Protein Human 重组人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白

NR8383(大鼠肺泡巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠小肠隐窝上皮细胞；IEC-6说明书IFNA8 Others Human 人 Ierferon alpha-B / IFNA8 人细胞裂解液 (阳性对照)

人生发基质细胞HHGMC

大耳山羊肾细胞;LDG-2

A549/DDP细胞，耐DDP肺癌细胞 中国仓鼠肺细胞,CHL细胞 CM-M002小鼠肺血管平滑肌细胞*培养基100mL

S-180(小鼠肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

Gibco 10639011 STEM PRO-34- COMBO 500ml