当前位置:上海抚生实业有限公司>>核酸检测试剂盒>>荧光PCR法>> 50T小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸检测试剂盒
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 分类 | 货号 |
小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸检测试剂盒 | 荧光-PCR法 | FS-P10356 |
特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
PCR技术的定量原理:
扩增曲线
在Real-time qPCR中,对整个PCR反应扩增过程进行了实时的检测并记录其荧光信号,随着反应的进行,监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线,即为扩增曲线。荧光扩增曲线一般分为基线期、指数增长期和平台期。
在Real-time qPCR扩增早期,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化,此时即为基线期。
PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数形式增加的,随着反应循环数的增加,最终PCR反应不再以指数形式生成模板,从而进入“平台期”。在该时期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系,所以根据最终的PCR产物量不能计算出初始模板量。
实验注意事项:
1)RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3)客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量(包括定量和相对定量)和定性分析。主要服务:DNA或RNA的定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
刺囊壳培养基: 0014分解纤维素提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 25-28℃ 液氮超低温冻结法;矿物油法
匍枝根霉(黑根霉)生长条件: 25-28℃培养基: 0014提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
酵母菌培养基: 436模式菌株: no土样提供形式: 冻干物安全等级: 1生长条件: 30℃ -80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法;其他
木霉生长条件: 25-28℃培养基: 14植物果实提供形式: 斜面培养物;冻干物模式菌株: no 真空冷冻干燥法;定期移植法
链霉菌属菌种抗耻垢分支杆菌模式菌株: no土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1培养基: CM0027生长条件: 28C
副流感病研究模式菌株: no病鸡提供形式: 冻干物安全等级: 2培养基: 0生长条件: 37
-391℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
酿酒酵母培养基: CM0077食用酵母提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 28℃ -80℃冰箱冻结法
地中海马特尔氏菌培养基: 471潜在的有机污染物降解菌/分离自十溴联醚富集菌群沉积物/TVG表层沉积物提供形式: 冻干物模式菌株: no生长条件: 28℃ 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
侧柄褐孔菌培养基: 17模式菌株: no子实体提供形式: 斜面培养物安全等级: 1生长条件: 25℃ 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
新城疫病制备活疫苗模式菌株: no病鸡提供形式: 冻干物安全等级: 3培养基: 0生长条件: 37
鸭瘟立默氏菌家畜流行病调查模式菌株: no鸭脑提供形式: 斜面培养物;冻干物安全等级: 2培养基: 330生长条件: 37℃
芽孢杆菌属菌种培养基: CM0002产生抗螟蛉抗菌素提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no生长条件: 37C 真空冷冻干燥
-392℃冰箱冻结;真空冷冻干燥
黑曲霉生长条件: 28-30℃培养基: CM0077提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no 真空冷冻干燥法
短杆菌培养基: 471潜在的新种,海洋放线菌沉积物/箱式样品提供形式: 斜面培养物模式菌株: no生长条件: 28℃ 液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法
儿价分橙xyleol orangeAR5g
N0364-5GpNPP4264-83-95g31
G4875-10GD(+)Glucosamine HCL D-安基葡萄糖29031-19-410g
伊红染色液100ml
metxyl Orange25g
间二甲本M-xyleneGCS2ml
JX0201200 μl 硅化吸头 带滤芯袋装179
B0885-1GBCIP, P-Toluidine salt 对甲本胺蓝6578-6-91G
Congo Red25g
Yeast nitnogen Base without Amino500g
大鼠烟酰胺腺嘌呤二核苷磷(NADPH)ELISA试剂盒 ,英文名: NADPH ELISA Kit
人抗膜DNA抗体(cmDNA)ELISA检测试剂盒Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit 96T/48T
大鼠toll样受体1(TLR1)免疫试剂盒 Rat toll-like receptor 1,TLR1 ELISA kit
CLIAKitforsP-selectin(HumansolubleP-selectin)ELISAKit人可溶性P选择素规格:48T/96T
人血液转铁蛋白(ANSFERRIN)免疫比浊法定量检测试剂盒20次
ELISAKitMIP-3β/ELC人巨噬炎性蛋白3β规格:48T/96T
小反刍兽疫病毒(PPRV)核酸检测试剂盒MLCB寒天培地规格:250g用途:用于沙门氏菌分离培养
志贺氏菌成套生化鉴定管(ZHGB)规格:16种*1套/盒*10盒用途:用于志贺氏菌的生化鉴定。组成:葡萄糖铵1支、西蒙氏枸橼盐1支、鸟氨脱羧酶1支、赖氨脱羧酶1支、氨基脱羧酶对照1支、尿素酶1支、粘液盐测试肉汤1支、粘液盐质控肉汤1支、水杨苷1支、七叶苷1支、半固体琼脂1支、甘露醇1支、棉子糖1支、甘油1支、ONPG 1支、色氨肉汤1支、无菌液体石蜡1支
胰胨-亚硫盐-环丝氨琼脂基础规格:250g用途:用于产气荚膜梭菌的平板计数(GB标准)
麦迪、麦白霉素检定培养基(普通琼脂斜面培养基)规格:250g用途:麦迪(白)霉素效价测定
产气荚膜梭菌测定用培养基规格:250g用途:用于产气荚膜梭菌的分离培养
BPL琼脂规格:250g用途:用于食品中沙门氏菌选择性分离培养
PCR检测试剂盒:
(一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4ºC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4ºC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4ºC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20ºC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
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