ELISA检测试验双抗体夹心法和竞争法比较

酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。它是应用最多的一种免疫酶技术。ELISA试剂盒（ELISAKits）已成为药物和植物病理学研究中的常用诊断工具，是检测组织提取液、血清和细胞培养液中目标抗体/抗原的理想工具，也是重要的质量控制手段。

ELISA检测试验双抗体夹心法和竞争法有以下几个方面的比较：

1、原理:

双抗体夹心法：利用两种针对抗原不同表位的特异性抗体，一种包被在固相载体上捕获抗原，另一种用酶标记用于检测被捕获的抗原，形成“固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体"复合物。

竞争 ELISA 法：分为直接竞争法和间接竞争法。直接竞争法是将酶标记的抗原和待检测的未标记抗原竞争结合固相抗体；间接竞争法是将未标记抗原和固相抗原竞争结合待检测的抗体，然后用酶标二抗检测结合的抗体。

2、检测对象:

双抗体夹心法：主要用于检测大分子抗原。

竞争 ELISA 法：直接竞争法适合检测小分子半抗原，间接竞争法适合检测抗体。

3、标准曲线:

双抗体夹心法：标准曲线通常为“S"型，随着抗原浓度增加，吸光度值上升。

竞争 ELISA 法：标准曲线通常为“反 S"型，随着待测物浓度增加，吸光度值下降。

4、灵敏度:

双抗体夹心法：灵敏度较高，尤其对于含量较低的抗原。

竞争 ELISA 法：直接竞争法对小分子检测的灵敏度较高。

5、特异性:

双抗体夹心法：特异性较高，需要两种抗体与抗原的特异性结合。

竞争 ELISA 法：特异性相对略低，尤其在竞争不全的情况下。

6、操作复杂性:

双抗体夹心法：步骤相对较多，操作较复杂。·

竞争 ELISA 法：操作相对简单。

7、应用场景:

双抗体夹心法：常用于生物医学中蛋白质、细胞因子等大分子物质的检测。

竞争 ELISA 法：常用于药物残留、激素等小分子物质的检测。