L929小鼠成纤维细胞-上海抚生实业有限公司

货号	A01X1069	规格	1×106
英文名称	L929细胞	产品分类	小鼠细胞系
实验类型	MEM+10%HS(马血清）+1%P/S	报告	（STR鼠源鉴定）报告

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

名称	929 (小鼠成纤维细胞) (种属鉴定正确)
别称	NCTC 929; NCTC-929; L cell; L cells; L-cell; L-cells; L cell line; L; 种属ain L-929; L-929; L 929; L929; L929(NCTC); Clone 929; Earles's cells; Earle's L cells
种属	小鼠
年龄（性别）	雄性，100日龄
组织来源	未知
生长特性	贴壁细胞
细胞形态	成纤维细胞样
背景描述	NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 种属ain L]细胞是1948年3月建立的细胞系L的克隆株；细胞系L是最早建立的连续培养细胞系之一，而NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 种属ain L]是最早的克隆株。从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的皮下疏松结缔组织入脂肪组织中建立了亲本细胞系L，第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of 种属ain L]。
生物安全等级	1
生长培养基	MEM＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例	1:3-1:4
推荐换液频率	2~3次/周
倍增时间	~28-36小时
冻存条件	冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
致瘤性	Yes, in immunosuppressed mice.
保藏机构	ATCC; CCL-1 ATCC; CRL-6364BCRC; 60091 BCRJ; 0188 DSMZ; ACC-2 ECACC; 85011425 ECACC; 85103115 ECACC; 88102702

细胞传代：

1. L929小鼠成纤维细胞试验准备：200ul/1mlTip 头各一盒(以上物品均需高压灭菌)，酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2. 弃掉培养皿中的培养基，用 1ml 的 PBS 溶液洗涤两次。

3. 用 Tip 头加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分钟(37℃，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞从壁上脱落下来为止。

4. 加入 1ml 的含血清培养基终止反应。

5. 用 Tip 头多次吹吸，使细胞分散开。

6. 将培养液装入离心管中，1000rpm 离心 5min。

7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择 0.8X106 个细胞加入一个 35mm 培养皿。

8. 将合适体积培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

9. 将培养皿转入 CO2培养箱中培养，第二天转染。

细胞转染：

1. 转染试剂的准备

① 将 400ul 去核酸酶水加入管中，震荡 10 秒钟，溶解脂状物。

② 震荡后将试剂放在－20 摄氏度保存，使用前还需震荡。

2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA 质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。

重组人白细胞介su-17 (活性的)	眼蜱通用PCR检测试剂盒说明书
展开青霉PCR试剂盒	盖膜蛋白βELISA试剂盒
人促性腺激su释放激su(GnRH)ELISA试剂盒	辅meiQ10ELISA试剂盒
人ADP-核糖基化因子4(ARF4)试剂盒ELISA	肝配蛋白A受体3ELISA试剂盒
人泛su蛋白D(UBD)检测试剂盒elisa	封闭蛋白1ELISA试剂盒
人G蛋白偶联受体109A(GPR109A)ELISA试剂盒	转位因子蛋白2ELISA试剂盒
FLAG Tag多肽	马梭菌PCR试剂盒
核suan内切meiG封闭多肽	毛样枝孢霉PCR检测试剂盒
DPRX蛋白封闭多肽	五种致泻性大肠杆菌PCR检测试剂盒(PCR 熔解曲线法)
长链脂肪suan延长mei长ELOVL5封闭多肽	禽肺病毒（APV）核suan检测试剂盒
D型-过氧化mei活化增生受体封闭多肽	欧洲放线菌PCR试剂盒
Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白封闭多肽	L929小鼠成纤维细胞泌尿道致病性大肠杆菌PCR试剂盒
液泡蛋白分选蛋白28封闭多肽	梅拉哥病毒RT-PCR试剂盒
9号染色体开放阅读框156封闭多肽	欧洲棕色野兔综合症病毒RT-PCR试剂盒
KIAA1958蛋白封闭多肽	疟原虫PCR检测试剂盒

细胞培养实验基本操作：
①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。
③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。
④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。
⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。
⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。