C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纤维细胞-上海抚生实业有限公司

货号	A01X1041	规格	1×106
英文名称	C3H/10T1/2 Clone8 细胞	产品分类	小鼠细胞系
实验类型	MEM+10%FBS+1%P/S	报告	（STR鼠源鉴定）报告

公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断！

名称	C3H/10T1/2, Clone 8 (小鼠胚胎成纤维细胞) (种属鉴定正确)
别称	C3H/10T1/2-clone8; C3H/10T1/2 CL8; C3H10T1/2CL8; 10T1/2; C3H10T1-2; C3H10T1/2; C3H-10T1/2; C3H 10T1/2; C3H/10T1/2
种属	小鼠
年龄（性别）	胚胎
组织来源	胚胎
生长特性	贴壁细胞
细胞形态	成纤维细胞样
背景描述	C3H/10T1/2, Clone 8细胞是由C·Reznikoff等人于1972从C3H系小鼠胚胎细胞分离。C3H/10T1/2, Clone 8细胞对过度长满的细胞有丝分裂抑制非常敏感，在同源小鼠中不产生肿瘤，无自然转化的背景；C3H/10T1/2, Clone 8细胞也不含明显内源性转化鼠类白血病或肉瘤病毒。
生物安全等级	1
生长培养基	MEM＋10% FBS＋1% P/S
推荐传代比例	1:2-1:4
推荐换液频率	2~3次/周
冻存条件	冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮
培养条件	气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃
致瘤性	No, in immunosuppressed mice.Yes, in semisolid medium.
保藏机构	ATCC; CCL-226 ECACC; 99072801

细胞传代：

1. C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纤维细胞试验准备：200ul/1mlTip 头各一盒(以上物品均需高压灭菌)，酒精棉球，废液缸，试管架，微量移液器，记号笔，培养皿，离心管。

2. 弃掉培养皿中的培养基，用 1ml 的 PBS 溶液洗涤两次。

3. 用 Tip 头加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分钟(37℃，5%CO2 )。用手轻拍培养瓶壁，观察到细胞从壁上脱落下来为止。

4. 加入 1ml 的含血清培养基终止反应。

5. 用 Tip 头多次吹吸，使细胞分散开。

6. 将培养液装入离心管中，1000rpm 离心 5min。

7. 用培养液重悬细胞，细胞计数后选择 0.8X106 个细胞加入一个 35mm 培养皿。

8. 将合适体积培养液加入离心管中，混匀细胞后轻轻加入培养皿中，使其均匀分布。

9. 将培养皿转入 CO2培养箱中培养，第二天转染。

细胞转染：

1. 转染试剂的准备

① 将 400ul 去核酸酶水加入管中，震荡 10 秒钟，溶解脂状物。

② 震荡后将试剂放在－20 摄氏度保存，使用前还需震荡。

2. 选择合适的混合比例(1：1－1：2/脂质体体积：DNA 质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。

造血干细胞抗原CD133封闭多肽	人副流感病毒2型PCR检测试剂盒
回归热疏螺旋体（回归热包柔螺旋体）PCR试剂盒	钙黏蛋白19ELISA试剂盒
人垂体腺苷suan环化mei激活肽(PACAP)ELISA检测试剂盒	分泌粒蛋白ⅤELISA试剂盒
人cAMP和cAMP抑制cGMP 3',5'循环磷suan二酯mei10A(PDE10A)ELISA试剂盒	内皮细胞特异分子-1ELISA试剂盒
人糖化血红蛋白A1c(GHbA1c)试剂盒ELISA	分拣连接蛋白19ELISA试剂盒
人P0蛋白抗体(IgG)检测试剂盒elisa	G-CSF
磷suan化视网膜母细胞瘤相关蛋白1封闭多肽	捻转毛细线虫PCR试剂盒
钾离子通道蛋白7封闭多肽	绵羊鞭虫PCR试剂盒
DNA拓扑异构mei3-β1封闭多肽	戈氏放线菌PCR试剂盒
着丝粒蛋白Q封闭多肽	猪瘟病毒RT-PCR试剂盒科研用
DPY19L4蛋白封闭多肽	牛血吸虫PCR检测试剂盒
氧化还原meiNDOR1封闭多肽	C3H/10T1/2 Clone8 小鼠胚胎成纤维细胞灭鲑气单胞菌PCR检测试剂盒
磷suan化B-Raf封闭多肽	绵羊附红细胞体（绵羊嗜血支原体）PCR试剂盒
6号染色体开放阅读框62封闭多肽	牛眼莫拉氏菌PCR试剂盒
液泡蛋白分选蛋白28封闭多肽	牛瘟病毒PCR试剂盒

细胞培养实验基本操作：
①进无菌室前要洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。
②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。
③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。
④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。
⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。
⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。