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货号 | BJ-01611159-2 |
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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
己糖激酶(HK)测试盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611159-2 |
商品介绍:
测定意义HK(EC 2.7.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶,催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。测定原理HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰。需自备的仪器和用品紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
蛋白激酶C(多肽抗原)爪哇根霉水通道蛋白3(AQP-3)elisa定量检测试剂盒
肾上腺su能受体β1(抗原)白黄侧耳分泌性白蛋白mei抑制因子(SLPI)elisa定量检测试剂盒
膜粘连蛋白-5(抗原)灰肉色链霉菌大鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)elisa定量检测试剂盒
水通道蛋白-4(抗原)球孢白僵菌大鼠促卵泡激su(FSH)elisa定量检测试剂盒
B7-H4(抗原)暗灰链霉菌去甲肾上腺su(NA/NE)elisa定量检测试剂盒
BADH2抗原唐菖蒲伯克霍尔德氏菌大鼠促黄体生成激su(LH)elisa定量检测试剂盒
骨钙su(抗原)粪产杆菌*可替丁(Cotinine)elisa定量检测试剂盒
钙激活通道蛋白白兰链霉菌不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)elisa定量检测试剂盒
BTG2(抗原)鬼伞属大鼠晚期糖基化终末产物(AGE)elisa定量检测试剂盒
原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)丛毛红曲霉大鼠上皮型钙黏蛋白 (E-Cad)elisa定量检测试剂盒
周期suD1(抗原)香蕉大鼠嗜酸粒趋化因子(ECF/CCL11)elisa定量检测试剂盒
β-酪蛋白(抗原)金耳大鼠热休克蛋白60(Hsp-60)elisa定量检测试剂盒
胆囊收缩su/缩胆囊su(八肽)莫哈韦芽孢杆菌大鼠白介su12 p35(IL-12 p35)elisa定量检测试剂盒
CD4(抗原)假单胞菌大鼠白介su1β(IL-1β)elisa定量检测试剂盒
CD4抗原黄绿绿僵菌*大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa定量检测试剂盒
己糖激酶(HK)测试盒紫外分光光度法微粒体谷胱S转移酶1(MGST1)试剂盒Anti-MMP14 AntibodyWolfram综合征蛋白1
基质金属蛋白mei7(MMP-7)试剂盒Anti-MMP16 Antibody磷酸化赖an酸缺陷型蛋白激酶1
蛋白S(PROS)试剂盒Anti-MMP16 AntibodyWNK4
心钠肽(ANP)试剂盒Anti-MMP2 Antibody包含氧化还原酶的WW域
p53上调凋亡调节因子(PUMA)试剂盒Anti-MMP2 Antibody色an酸丰富蛋白
肿瘤蛋白P53(TP53)试剂盒Anti-MMP20 AntibodyX射线修复交叉互补蛋白
调节正常T表达和因子(RANTES)试剂盒 Anti-MMP24 AntibodyDNA补充修复XPC蛋白
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
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