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货号 | BJ-01611168-2 |
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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒紫外分光光度法 | 紫外分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611168-2 |
商品介绍:
测定意义 3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的关键酶,广泛存在于动植物和微生物体内,催化1,3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸,产生1分子ATP,具有影响DNA复制和修补及刺激病毒RNA合成等生物学功能,广泛应用于药物靶标设计。 测定原理 3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP产生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脱氢酶和NADH作用下产生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm处的吸光度变化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。 自备实验用品及仪器 天平、低温离心机、研钵、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
血管粘附蛋白1(多肽抗原)优美红游动菌大鼠α2抗纤溶酶(α2-AP)elisa定量检测试剂盒
波形蛋白(抗原)庆丰链霉菌大鼠血管紧张suI(ANG I)elisa定量检测试剂盒
VSIG4 T淋巴负调节蛋白之一(抗原)红色红曲大鼠白介su25(IL-25)elisa定量检测试剂盒
一种新的丝an酸/苏an酸激酶家族成员的基因WNK4(多肽抗原)嗜石油腐皮镰孢大鼠酸性成纤维生长因子(AFGF/FGF1)elisa定量检测试剂盒
锌指蛋白300(抗原)蜡状芽孢杆菌大鼠组织蛋白meiB(CTSB)elisa定量检测试剂盒
锌指脂蛋白-1a(抗原)腐霉大鼠角蛋白18(CK-18/KRT18)elisa定量检测试剂盒
锌指脂蛋白-1b(抗原)枯草芽胞杆菌大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪an酸激酶2(Tie-2)elisa定量检测试剂盒
人锌指脂蛋白-1c(抗原)曲霉属大鼠神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)elisa定量检测试剂盒
干扰su-γ多肽抗原(大、小鼠)小单孢菌大鼠畸胎瘤源性生长因子1(TDGF1)elisa定量检测试剂盒
干扰su-β抗原真鲴希瓦氏菌大鼠生长分化因子6(GDF6)elisa定量检测试剂盒
干扰su-β抗原淡紫拟青霉大鼠NAD依赖性蛋白脱乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)ELISA kit
前列腺干抗原竹瘤座菌大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽27环化酶激活肽27(PACAP-27)elisa定量检测试剂盒
聚集蛋白抗原冷杉粘褶菌大鼠水通道蛋白2(AQP-2)elisa定量检测试剂盒
三磷酸腺柠檬酸裂解酶坏损尾孢大鼠肾上腺髓质su(ADM)elisa定量检测试剂盒
脂肪增强结合蛋白1泡盛曲霉大鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)elisa定量检测试剂盒
3磷酸甘油酸激酶(PGK)测试盒紫外分光光度法腺苷酸环化酶1(ADCY1)试剂盒 Anti-MX2 Antibody锌指FYVE结构域蛋白27
间隙连接蛋白40(CX40)试剂盒 Anti-MYB Antibody受精卵抑制蛋白1
嗜环蛋白/亲环suA(CYPA)试剂盒 Anti-MXD1 Antibody锌指蛋白471
弹性蛋白微纤维界面蛋白1(EMILIN 1)试剂盒Anti-MYBL1 Antibodyγ-氨基丁酸A受体相关膜蛋白3
磷酯酰肌特异性磷脂酶Cβ1(PLCβ1/PI-PLC)试剂盒 Anti-MYBL2 Antibody锌指蛋白909
氨基端前脑钠su(NT-proBNP)试剂盒Anti-MYC Antibody锌指蛋白420
衰老关键蛋白5(FBLN5)试剂盒Anti-MYBPC3 Antibody周期蛋白1结合蛋白
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
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