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货号 | BJ-0161193-2 |
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特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
NO含量测试盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | BJ-0161193-2 |
商品介绍:
测定意义: NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。 测定原理: NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。 自备实验用品及仪器: 天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。 |
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
PE-Cy3标记的兔抗羊IgG歧异假丝酵母单宁酸1401-55-4
Alexa Fluor 350标记的兔抗羊IgG黑曲霉fu酶Q10303-98-0
Alexa Fluor 488标记的兔抗羊IgG旋毛壳丹参酮IIA磺酸钠69659-80-9
Alexa Fluor 555标记的兔抗羊IgG黄暗青霉育亨宾146-48-5
Alexa Fluor 647标记的兔抗羊IgG雅致小克银汉霉glycyrrhizic酸铵53956-04-0规格
PE-Cy5.5标记的兔抗羊IgG固氮菌人参皂苷Rh4174721-08-5
PE-Cy7标记的兔抗羊IgG绳状青霉nepetin-7-glucoside569-90-4
Cy3标记的兔抗羊IgG大肠埃希氏菌银杏黄酮481-46-9
Cy5标记的兔抗羊IgG黑曲霉6,7-dihydroxycoumarin305-01-1
Cy5.5标记的兔抗羊IgG褐囊蜜环菌香叶木su520-34-3
Cy7标记的兔抗羊IgG堆形艾美耳球虫闹羊花suIII26342-66-5
生物su标记的兔抗羊IgG小鹅瘟阳性血清参考品(检验用)柴胡皂甙b258316-41-9
罗丹明标记的兔抗羊IgG嗜麦芽寡养单胞菌竹节参皂苷IVa19895-95-5规格
性磷酸酶(AP)标记的兔抗羊IgG枯草芽孢杆菌水合氧化前胡su2643-85-8
FITC标记的兔抗羊IgG蜡状芽孢杆菌灵芝B104700-96-1
NO含量测试盒可见分光光度法胰岛su样蛋白3(INSL3)试剂盒Anti-HSPA5 Antibody肿瘤相关蛋白抗原L6
胰腺再生蛋白3γ(REG3γ)试剂盒Anti-HSPA8 Antibody转录增强因子TEF4
GTP酶活化蛋白(GAP)试剂盒 Anti-HSPA8 Antibody缺氧诱导蛋白HIG1
钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)试剂盒Anti-HSPB1 AntibodyThimet内肽酶
成纤维生长因子4(FGF4)试剂盒 Anti-HSPA9 Antibody肿瘤坏死因子诱导蛋白3相互作用蛋白1
组织蛋白meiD(CTSD)试剂盒 Anti-HSPB1 Antibody四连接suTN
天门冬an酸氨基转移酶(AST)试剂盒 Anti-HSPA9 AntibodyToll样受体1
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
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