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货号 | BJ-01611382-2 |
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商品介绍:
测定意义 维生素B1(Vitamin B1)是构成脱羧fu酶的主要成分,参与细胞代谢中的三羧酸循环,是维持机体正常代谢必须的水溶性维生su,在生物体能量代谢中有重要的作用。 测定原理 VB1在碱性条件下还原铁氰hua钾生成亚铁氰hua钾,亚铁氰hua钾与Fe3+在弱酸条件下生成普鲁士蓝,在704nm有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、可见分光光度计、恒温水浴锅、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。 |
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称 | 检测方法 | 规格 | 货号 |
维生素B1测试盒可见分光光度法 | 可见分光光度法 | 50管/48样 | BJ-01611382-2 |
测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项:
待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
一个试剂盒如果不能在3次内使用完毕,其中的WST-8需要在使用时适当分装,以避免反复冻融导致的检测效果下降。
标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时,标准品也宜使用SOD样品制备液进行稀释;当样品为血液等无需处理的样品时,宜使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。
抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
胰岛抗原12/核转录因子SOX13抗体*松乳菇
有丝分裂相关蛋白INSC抗体乌饭树拟茎点霉银杏suan C15:1
磷suan化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗体豇豆慢生根瘤菌乙酰哈巴苷
RAN结合蛋白7抗体阪崎肠杆菌射干
兔抗人γ-链淡黄曲霉金银花
免疫球蛋白超家族成员B抗体黑曲霉麦芽
六磷suan肌激酶3抗体裂孔平伏菌大叶骨碎朴
干扰sukappa蛋白抗体菊苣假单胞菌牡丹皮
白介su1α/IL-1α抗体酿酒酵母盐suan丙卡特罗
白介su1α/IL-1α抗体芽孢杆菌
磷suan化白介su2受体β链抗体枯草芽孢杆菌甲磺suan多沙唑嗪
胰岛su样蛋白3抗体酿酒酵母葡萄糖suan钠
内质网核信号转导蛋白a1抗体华根霉
重组人白介su18抗体黄伞(可订购)双氯芬suan钾
α胰蛋白mei重链H4抗体毕赤酵母黑su瘤相关蛋白抗体流式免疫组化
维生素B1测试盒可见分光光度法肽酰脯氨酰异构酶/亲环su样蛋白1(PPIL1)试剂盒Anti-CLDN1 Antibody纤维母生长因子4抗原
磷脂转运蛋白(PLTP)试剂盒Anti-CLDN10 Antibody纤维母生长因子5抗原
7(KLK7)试剂盒 Anti-CLDN19 Antibody衰老关键蛋白抗原
碳suan酐酶VI(CA6)试剂盒Anti-CLDN2 AntibodyFosB抗原
线粒体解偶联蛋白2(UCP-2)试剂盒Anti-CLDN19 AntibodyFOS样抗原2
血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)试剂盒 Anti-CLDN3 Antibody叉头蛋白F1抗原
髓鞘性蛋白(MBP)试剂盒Anti-CLDN5 Antibody插头蛋白J1抗原
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