细胞核蛋白提取试剂盒100T实验方法使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
产品名称：细胞核蛋白提取试剂盒100T实验方法
产品简介：
核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞中提取核蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
细胞核蛋白提取试剂盒100T实验方法操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
细胞核蛋白提取试剂盒100T实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
白屈菜 Chelidonium majus L. Sanguinarine 血根碱 2447-54-3 C20H14NO4+ ≥98%
高三尖杉酯减HomohcrringtoninqHPLC≥98%,20mg/支
茶减 Theophylline 58-55-9 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
HPLC法含量测定盐酸布替奈芬100681-200501常温，避光100mg
Ibuprofen *标准品15687-27-1 750mg
160337-95-1 *标准品(NA) 15mg
高丽槐速;马卡因GaoLihuai;maackiain19908-48-6HPLC≥98%,20mg/支
LaMiide LAMIIDE 27856-54-8
噻嘧啶相关物质A标准品25mg噻嘧啶相关物质A标准品
5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸 117570-53-3 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
黄连碱 Coptisine (≥98%,HPLC) 3486-66-6 20MG 标准品
余甘子Phyllanthus emblica 算盘子二醇 6610-56-6 C30H50O2 ≥97.5% 胡黄连苦甙 I168195
Sesamin芝麻素607-80-720mg/支
Oxymetxolone CIII羟甲稀龙标准品434-07-1 200mg
长春花 Catharanthus roseus (L.)G.Don Catharanthine 长春质碱 2468-21-5 C21H24N2O2 ≥98%
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