细胞核蛋白提取试剂盒50T免费代测产品简介:
核蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种原代或传代细胞中提取核蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核蛋白不仅纯度高,保持天然活性,而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
细胞核蛋白提取试剂盒50T免费代测实验操作步骤:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量为 1mL ,其他培养器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此类推;对于细胞悬液每50~100 万细胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取适量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超纯水的比例稀释JC-1 。剧烈震荡充分溶解并混匀 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色缓冲液(5 ×),混匀后即为 JC-1 染色工作液。
2、阳性对照的设置:
把试剂盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到细胞培养液中,稀释至10uM ,处理细胞 20 分钟。随后按照下述方法装载 JC-1 ,进行线粒体膜电位的检测。对于大多数细胞,通常10uM CCCP处理 20 分钟后线粒体的膜电位会*丧失,JC-1 染色后观察应呈绿色荧光;而正常的细胞经JC-1 染色后应显示红色荧光。对于特定的细胞,CCCP 的作用浓度和作用时间可能有所不同,需自行参考相关文献资料决定。
3、对于悬浮细胞:
(1)取 10~60 万细胞,重悬于 0.5mL 细胞培养液中,细胞培养液中可以含血清和酚红。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,颠倒数次混匀。细胞培养箱中 37 ℃孵育20 分钟。
(3)在孵育期间,按照每 1mL JC-1 染色缓冲液(5×)加入 4mL 蒸馏水的比例,配制适量的JC-1 染色缓冲液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育结束后,600g 4 ℃离心3 ~4 分钟,沉淀细胞。弃上清,注意尽量不要吸除细胞。
(5)用JC-1 染色缓冲液(1×)洗涤 2 次:加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。再加入 1mL JC-1 染色缓冲液(1×)重悬细胞,600g 4 ℃离心 3~4 分钟,沉淀细胞,弃上清。
(6)再用适量 JC-1 染色缓冲液(1×)重悬后,用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察,也可以用荧光分光光度计检测或流式细胞仪分析。
细胞核蛋白提取试剂盒50T免费代测注意事项
(1)本试剂只适用于实验,不适用于临床检测;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙锭)有毒性,能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用,使用时需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物质,在操作时请注意避光。在处理和标记时,尽可能在暗处进行。在孵育阶段,用铝箔包裹容器或置于抽屉中。细胞标记后,在暗室内用显微镜观察;
(4)整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作,以免影响细胞状态。
(5)在细胞洗涤的后一步,请尽量将上清弃净,以免PBS残留,有可能会影响实验结果。
(6)为防止荧光衰变,宜在1小时内进行流式检测。
(7)PI染色时间过长有可能造成检测的凋亡率偏高,建议首*行Annexin V-FITC染色,短可在上机前5分钟再加入PI染色。
檀香Santalum album Santalol 檀香醇 11031-45-1 C15H24O ≥98%
白屈菜红减ChqlqrythrinqHPLC≥98%;20mg/支
茶黄素-3-没食子酸酯 Theaflavin-3-Gallate(TF-3-G) 30462-34-1 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
中药对照药材猪殃殃121513-200501TLC法鉴别
BACOSIDE A3 苦艾素A3纯度:>95%
16150-44-0 *相关物质A标准品 25mg
狗牙花 Ervatamia kwangsiensis Tsiang 狗牙花减 D 119188-37-3 C20H30O3 ≥98% *(N0700000
HDI Derivative标 m7i Derivative标 2,6-TDI Derivat
Polyvinyl Acetate Dispersion聚乙酸酯分散体标准品9003-20-7 1g聚乙酸酯分散体标准品
重楼皂苷VII 76296-75-8 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
附子灵 Fuziline 分 子 量:454.0000 分子式:C24H39NO7 附子灵 --(Fuziline )的详细信息 【性状】白色晶体,熔点208~209 ℃,可溶于、饼酮、DMSO等溶剂。 【主要用途】用于含量测定/鉴定/药理实验等。
余甘子Phyllanthus emblica Momor-cerebroside I Momor-脑苷脂I 606125-07-9 C48H93NO10 DL-别苏安酸01595-100
含量测定脱水*内酯琥珀酸半酯111598-200807-20℃,避光20mg
Polyoxyl 10 Stearyl 聚氧硬脂酸酯标准品9005-00-9 1g
半枝莲Scularia barbata 4'-xy7noxywogonin 4'-羟基汉黄芩素 57096-02-3 C16H12O6 ≥98.5%
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