细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒50T售后服务使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
产品名称:细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒50T售后服务
储存条件:2-8℃保存。
有效期:一年。
产品简介:
脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性*(在250℃下干热灭菌2h才*灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒50T售后服务操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒50T售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
茶叶 Camellia sinensis(L.)O.Kuntze Theophylline * 58-55-9 C7H8N4O2 ≥98%
原柏部次减Thqoriginclstqmonidinq169234-82-45mg
毛冬青皂苷B1;毛冬青皂甙B1 Ilexsaponin B1 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
对照品仑安西林130534-200301含量测定
芦荟宁 Aloenin 38412-46-3 20mg HPLC≥98% 用于含量测定
299-27-4 葡萄糖酸钾标准品 200mg
蔓荆子皇速;紫花牡荆速VitextrifoliaHuangSu;Casticin479-91-4HPLC≥98%,20mg/支
Rauvotetraphylline C 1422506-51-1
*(五水) 标准品 号:22189-32-8 250MG
(+)-松萝酸钠 34769-44-3 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
58648-57-0 *锂标准品 200mg
野柏合减;单响尾蛇毒蛋白;大叶猪尿青Monocrotaline;monocrotalin;lobarpigurineplueHPLC≥99%,200mg/支
6,8-Diprenylorobol 6,8-DIPRENYLOROBOL 66777-70-6
Desogestrel去氧孕烯标准品54024-22-550mg去氧孕烯标准品
氧化* 54809-74-4 HPLC≥98%;20mg 订购|咨询
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