活细胞/死细胞双染试剂盒500T售后服务使用注意事项
1．微量试剂取用前请离心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿*、戴手套等。
4．本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不*用于检测组织样本。
活细胞/死细胞双染试剂盒500T售后服务操作方法
1．悬浮细胞离心（2000rpm离心5min）收集；贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次（2000rpm离心5min）收集1~5×105细胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混匀；室温、避光、反应5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞；
4．请在1 hour内，进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A．荧光显微镜观察
1．滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上，并用盖玻片盖上细胞；
2．对于贴壁细胞来说，也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡；
（1）将细胞于盖玻片上生长，用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡，并设立阴性对照组；
（2）用PBS洗涤细胞两次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混匀；
（4）将上述溶液滴加于盖玻片表面，使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖；
（5）避光、室温反应5 min。
3．将盖玻片倒置于载玻片上，于荧光显微镜下观察激发波长546nm，发射波长647 nm，7-AAD荧光信号呈红色。
B．流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测，激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
活细胞/死细胞双染试剂盒500T售后服务实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2％的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时，注意必须*清除EDTA：在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤，清除EDTA，以免残余的EDTA与Ca2＋螯合，影响Annexin V的结合。
（1）用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer；
（2）细胞收集。悬浮细胞收集：离心5分钟；贴壁细胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化时间不宜过长，否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合），于室温2000rpm离心5～10分钟，收集细胞；
（3）细胞洗涤：用预冷1×PBS（4℃）重悬细胞一次，2000rpm离心5～10分钟，洗涤细胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞；
（5）Annexin V-FITC标记：加入5μL的Annexin V-FITC混匀后，避光，室温孵育15分钟；
（6）PI标记：上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
（7）上机前，补加200μL的1×Binding Buffer。
BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0005293T(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人细胞裂解液 (阳性对照)
KB/V细胞，人口腔上皮癌长春新碱耐药株 人血管内皮细胞,EC-304细胞 大鼠骨髓瘤细胞;Y3-Ag 1.2.3
大鼠肝癌细胞;CBRH-7919 [CBRH7919]
CNTN3 Others Human 人 CNTN3 / Contactin-3 人细胞裂解液 (阳性对照)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2
IL18R1 Others Rat 大鼠 IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照)
膀胱癌组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)/1ml
PAN-1细胞，胰腺导管上皮癌细胞 人细胞,HeLa-S3细胞 人小脑颗粒细胞总RNAHCGC tRNA
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7
GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨细胞病毒 HCMV gB 人细胞裂解液 (阳性对照)
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人细胞裂解液 (阳性对照)
气道平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
正常小鼠Leydig细胞;TM3
LTEP-sm细胞，人小细胞肺癌细胞 小鼠皮肤细胞,JB6-C41细胞 CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内皮细胞)5×106cells/瓶×2
TE-1(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2
HUtMEC-c 人子宫微血管内皮细胞(HUtMEC) 500,000cells 脐静脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)
大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA试剂盒 ，英文名： AQP-4 ELISA Kit
人血清一氧化氮(NO)ELISA检测试剂盒Humannitricoxide,NOELISAKit 96T/48T
蝌蚪雌二醇(E2)免疫试剂盒 Tadpole Estradiol,E2 ELISA kit
CLIAKitforPPAR-Gamma(HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorGamma)ELISAKit人过氧化物酶体增殖因子活化受体γ规格：48T/96T
石蜡切片组织IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
ELISAKitSP-C人肺表面活性物质相关蛋白C规格：48T/96T
小鼠骨桥素(OPN)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human growth hormone binding protein (GHBP) ELISA Kit 人生长激素结合蛋白(GHBP)ELISA试剂盒
HumanSecretinELISAKit 人促胰液素/胰泌素(Secretin)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humananti-respiratorysyncytialvirusantibody,RSVELISA试剂盒人抗呼吸道合胞病毒抗体(RSV)ELISA试剂盒规格：96T/48T
植物细胞叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次
HumanTumornecrosisfactorα，TNF-αELISAKit人坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T
活细胞/死细胞双染试剂盒500T售后服务小鼠β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidaseA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
