procaspase-3激活剂200ul实验方法使用注意事项
1.微量试剂取用前请离心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿*、戴手套等。
4.本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不*用于检测组织样本。
procaspase-3激活剂200ul实验方法操作方法
1.悬浮细胞离心(2000rpm离心5min)收集;贴壁细胞用*消化收集用PBS洗涤细胞二次(2000rpm离心5min)收集1~5×105细胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混匀;室温、避光、反应5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer悬浮细胞;
4.请在1 hour内,进行下述荧光显微镜或流式细胞仪的观察和检测。
A.荧光显微镜观察
1.滴一滴上述染色后的细胞悬液于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞;
2.对于贴壁细胞来说,也可直接用盖玻片来培养细胞并诱导细胞凋亡;
(1)将细胞于盖玻片上生长,用适当的凋亡诱导剂诱导细胞凋亡,并设立阴性对照组;
(2)用PBS洗涤细胞两次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混匀;
(4)将上述溶液滴加于盖玻片表面,使长有细胞的盖玻片表面均匀覆盖;
(5)避光、室温反应5 min。
3.将盖玻片倒置于载玻片上,于荧光显微镜下观察激发波长546nm,发射波长647 nm,7-AAD荧光信号呈红色。
B.流式细胞仪分析
用流式细胞仪检测,激发波长Ex=546 nm; 发射波长Em=647 nm。
7-AAD红色荧光建议使用FL3通道检测。
procaspase-3激活剂200ul实验方法实验步骤
贴壁细胞需用0.25%的*消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的*消化时,注意必须*清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上磷脂酰*与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。
Calu-1(人肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2
CM-M037小鼠小肠隐窝上皮细胞*培养基100mL
KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人细胞裂解液 (阳性对照)
TE-10细胞,人食管癌细胞 人脑胶质母细胞瘤细胞,TG-905细胞 家猫皮肤细胞;FCA-S1
小鼠肉瘤瘤株;S180
PTPRC Others Human 人 CD45 人细胞裂解液 (阳性对照)
*HBSS
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人细胞裂解液 (阳性对照)
人角膜内皮细胞*培养基 100mL
B95-8细胞,产EBV的绒猴白细胞 A549(人肺腺癌细胞) 非洲绿猴肾细胞;BS-C-1
EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)
HEL(人红白细胞白血病细胞) 5×106cells/瓶×2 肝实质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照)
前脂肪细胞分化培养基PADM-prf
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMYF
大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E 红白细胞白血病细胞,HEL299细胞 PT67细胞,鼠逆转录酶病毒包装细胞
JEC, 人子宫内膜腺癌细胞系 Human
LRP1 Others Human 人 LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人细胞裂解液 (阳性对照)
大鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人血清/糖皮质激素调节激酶2(SGK2)免疫试剂盒 human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,SGK2 ISA KIT
人抗核周因子抗体(APF)ELISA试剂盒 ,英文名: APF ELISA Kit
RatInterferonβ,IFN-β/IFNBELISA试剂盒大鼠β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISA试剂盒人胃肠癌标志物CA199ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInterleukin13,IL-13ELISAKit人白介素13(IL-13)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠*巯基转移酶(GST)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 人*结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒
HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanAnti-smoothmuscleantibody,ASMAELISA试剂盒人抗平滑肌抗体(ASMA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物细胞周期S早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒10次
HumantrypsinELISAKit人*(trypsin)ELISA试剂盒规格:96T/48T
procaspase-3激活剂200ul实验方法小鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠apelin12(AP12)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠8异前列腺素(8-iso-PG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装